[发明专利]羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用

权利要求书

1.羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述应用在无菌条件下从健康足月顺产胎儿的胎盘胎儿面钝性分离羊膜，用含有双抗溶液的无菌生理盐水清洗数次直至液体清亮，并用缓冲液对羊膜进行冲洗，然后将羊膜剪碎，将剪碎后的羊膜等间距的接种在一次性塑料无菌培养瓶中，并于培养瓶中加入适量的培养液。

3.根据权利要求2所述的羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，其特征在于：所述培养瓶放置于恒温37度、并使得饱和湿度、体积分数为5％的二氧化碳培养箱中，所述培养瓶在培养箱中培养后，更换培养液，弃去未贴壁的细胞，根据羊膜周围细胞生长情况，决定换液时间。

4.根据权利要求3所述的羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，其特征在于：所述培养瓶中的培养液弃去，并用无菌PBS清洗两次，除去残留的培养液，然后加入0.25％胰岛蛋白酶溶液，37度处理2分钟左右，将培养瓶中的细胞放入离心管中并离心3分钟，丢弃上清液，沉淀用培养液重悬，并将其继续培养在培养液中，补足培养液，次日换液，以后隔日换液一次，得到人羊膜间充质干细胞。

5.根据权利要求2所述的羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，其特征在于：所述培养瓶在培养箱中培养时间为48-72h。

6.根据权利要求2所述的羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，其特征在于：所述培养瓶中加入诱导剂、培养基、甘油磷酸钠和地塞米松。

7.根据权利要求3所述的羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，其特征在于：所述人羊膜间充质干细胞对患者进行ADMSCs移植联合常规治疗。

8.根据权利要求7所述的羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，其特征在于：所述患者在6、12、24个月的空腹C肽、空腹血糖、餐后2h血糖、FC-P与血糖比值、糖化血红蛋白含量进行检测，并观察患者有无不良反应情况。

9.根据权利要求8所述的羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，其特征在于：所述患者体内的餐后2h血糖、FC-P与血糖比值、糖化血红蛋白含量均比患者治疗前明显降低。