[发明专利]一种TanCAR的构建及其应用

权利要求书

1.一种TanCAR，其特征在于，在第三代CAR骨架的基础上构建而成，由识别靶细胞表面靶分子的胞外段部分、跨膜部分及细胞内信号转导部分三部分组成。TanCAR中识别靶细胞表面靶分子的胞外段部分由具有核苷酸序列表中NO1所示的碱基序列的IL13(E13K.R66D.S69D.R109K)突变体序列与具有核苷酸序列表中NO2所示的EphA2 scFv序列组成，其IL13(E13K.R66D.S69D.R109K)突变体序列位于识别靶细胞表面靶分子的胞外段部分的5’端，EphA2 scFv序列位于识别靶细胞表面靶分子的胞外段部分的3’端，两段序列由GGGS linker的核酸序列间隔。

2.如权利要求1所述的TanCAR，其特征在于，所说的核苷酸序列表中NO1所示的碱基序列中IL13(E13K.R66D.S69D.R109K)突变体氨基酸序列为：

TCCCCAGGCCCTGTGCCTCCCTCTACAGCCCTCAGGAAGCTCATTGAGGAGCTGGTCAACATCACCCAGAACCAGAAGGCTCCGCTCTGCAATGGCAGCATGGTATGGAGCATCAACCTGACAGCTGGCATGTACTGTGCAGCCCTGGAATCCCTGATCAACGTGTCAGGCTGCAGTGCCATCGAGAAGACCCAGGACATGCTGGACGGATTCTGCCCGCACAAGGTCTCAGCTGGGCAGTTTTCCAGCTTGCATGTCCGAGACACCAAAATCGAGGTGGCCCAGTTTGTAAAGGACCTGCTCTTACATTTAAAGAAACTTTTTAAGGAGGGACAGTTCAAC。

3.如权利要求1所述的TanCAR，其特征在于，所说的蛋白序列表中NO1所示的氨基酸序列中IL13(E13K.R66D.S69D.R109K)蛋白序列为：

SPGPVPPSTALRKLIEELVNITQNQKAPLCNGSMVWSINLTAGMYCAALESLINVSGCSAIEKTQDMLDGFCPHKVSAGQFSSLHVRDTKIEVAQFVKDLLLHLKKLFKEGQFN。

4.如权利要求1所述的TanCAR，其特征在于，所说的核苷酸序列表中NO2所示的碱基序列中优化酶切位点以及增添linker的EphA2 scFv核酸序列为：

TTCGAACAGGTTCAATTGTTAGAGTCTGGTGGTGGCCTGGTACAACCAGGTGGCTCCCTCAGGCTCAGCTGCGCCGCATCAGGATTTACTTTCAGCTCTTATACTATGAGTTGGGTTAGACAAGCCCCTGGGCAAGCCCTCGAATGGATGGGAACAATCTCGTCCGGAGGCACATATACCTACTACCCCGACTCCGTCAAAGGTCGGTTTACGATCAGCCGTGACAACGCCAAAAATTCCCTGTACCTACAAATGAACTCTCTAAGAGCTGAAGATACTGCAGTCTATTATTGCGCCAGAGAAGCTATCTTCACTTACTGGGGACGTGGTACGTTAGTGACAGTCTCATCGGGCGGTGGCGGTTCTGGTGGCGGTGGCTCCGGCGGTGGCGGTTCTGACATTCAGCTAACTCAAAGTCCATCGTCGCTATCAGCCAGCGTAGGAGACAGAGTCACAATCACGTGCAAAGCGAGCCAAGACATCAATAACTATCTTTCATGGTATCAACAGAAACCTGGCCAAGCACCGCGTTTACTTATATACAGAGCAAATCGGTTGGTAGACGGTGTCCCCGACAGATTCTCTGGTTCAGGTTACGGGACGGACTTTACCTTAACAATTAATAACATCGAGAGTGAAGATGCGGCTTACTATTTCTGCCTGAAATACGACGTGTTCCCATATACATTTGGTCAGGGTACTAAGGTTGAGATTAAAGCTAGC。