[发明专利]一种用于干细胞大规模培养的可溶性微载体在审
申请号: | 202210199031.9 | 申请日: | 2022-03-02 |
公开(公告)号: | CN114561348A | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 杨晓晨 | 申请(专利权)人: | 北京圣美细胞生命科学工程研究院有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C12N5/00 |
代理公司: | 北京和联顺知识产权代理有限公司 11621 | 代理人: | 胡杨 |
地址: | 101312 北京市顺义区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 干细胞 大规模 培养 可溶性 载体 | ||
1.一种用于干细胞大规模培养的可溶性微载体,其特征在于,该可溶性微载体包含以下原料:胶原蛋白、L-谷氨酰胺、硫酸镁,氯化钙、氯化钾、丙酮酸钠、D-葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钙、L-甲硫氨酸、羟乙基哌嗪乙磺酸和水。
2.根据权利要求1所述的可溶性微载体,其特征在于,所述可溶性微载体包含以下百分比的原料:10%~30%的胶原蛋白、0.001%~0.1%的L-谷氨酰胺、0.001%~0.1%的硫酸镁,0.005%~0.2%的氯化钙、0.01%~0.5%的氯化钾、0.01%~0.5%的丙酮酸钠、0.1%~1%的D-葡萄糖、0.1%~5%的碳酸氢钠、0.1%~5%氯化钙、0.01%~0.5%的L-甲硫氨酸和0.1%~5%的4-羟乙基哌嗪乙磺酸,余量为水。
3.根据权利要求1所述的可溶性微载体,其特征在于:所述可溶性微载体的粒径为500~800μm。
4.根据权利要求1所述的可溶性微载体,其特征在于:所述可溶性微载体的内部呈有规格排列的微米多孔结构。
5.根据权利要求1所述的可溶性微载体,其特征在于:所述可溶性微载体能够被胰蛋白酶消化溶解。
6.根据权利要求1所述的可溶性微载体,其特征在于:所述胶原蛋白是通过微生物发酵法制备获得。
7.根据权利要求1-6任一项所述的可溶性微载体,其特征在于:所述可溶性微载体的制备方法包括如下步骤:
1)将胶原蛋白、L-谷氨酰胺、硫酸镁,氯化钙、氯化钾、丙酮酸钠、D-葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钙、L-甲硫氨酸、羟乙基哌嗪乙磺酸按配比加入水中,加热溶解,充分搅拌,直至所有成分完全溶解,形成半凝胶;
2)通过微流道间歇式向步骤1)得到的半凝胶中通入等量空气,形成均一气泡,气泡充满材料后停止通气;
3)等待半凝胶完全凝固,穿透贯通半凝胶内气泡,形成规格排列的微米多孔结构。
8.根据权利要求7所述的可溶性微载体,其特征在于:步骤1)中,所述加热溶解的温度为130℃。
9.根据权利要求7所述的可溶性微载体,其特征在于:步骤2)中,所述微流道为直径3~5μm的管道。
10.根据权利要求7所述的可溶性微载体,其特征在于:步骤3)中,所述穿透贯通半凝胶内气泡的具体操作为:使用直径50~150μm的穿刺针进行交叉穿刺,贯通半凝胶内气泡。
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