[发明专利]一种微小组织的石蜡切片的制作方法及其应用在审
申请号: | 202210198959.5 | 申请日: | 2022-03-02 |
公开(公告)号: | CN114563258A | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 黄琼;陈静瑶;徐恩萍;张红河;韩丰艳;李英娘;张诚程;俞雅君 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N1/36 | 分类号: | G01N1/36;G01N1/28;G01N1/06;G01N21/84 |
代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 皋吉甫 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微小 组织 石蜡 切片 制作方法 及其 应用 | ||
1.一种微小组织样本的石蜡切片制作方法,具体包括:
1)样本处理:包括福尔马林固定、脱水、透明、浸蜡;
2)视野放大装置准备:在包埋机边上配置电子放大镜,将智能移动终端置于视野前端,并连接电子放大镜对应的应用软件,调节焦距直至显示清晰的视野图像;
3)石蜡包埋:浸蜡样本在离心管沉底并完全冷凝后,离断带样本的离心管底部放进包埋框,置于包埋机热台上,加入液体蜡,加热金属包埋框边缘,待离心管底部石蜡融化,取出样本置于包埋框中,待石蜡完全融化样本全可见;在智能移动终端应用软件中显示的视野中调整包埋面,保持位置不变的情况下将样本移至冷却台,完成包埋;
4)切片:a)调整刀片角度;b)粗修石蜡块,切除表面石蜡;c)蜡块置于-20℃冰箱预冷;d)将蜡块按之前修片的方向固定好样本;e)轻柔、匀速,切片厚度3μm;f)将蜡片在摊片机热水中展平,然后平铺于载玻片上,烤片,自动染色仪进行HE染色。
2.根据权利要求1所述的方法,其中步骤1)中的福尔马林固定的操作为4%福尔马林溶液常温固定24小时,移除固定液。
3.根据权利要求1所述的方法,其中步骤1)中的脱水为吸取50%,75%,90%乙醇1ml加入带有样品的离心管,各30分钟,95%乙醇30分钟两次, 100%乙醇三次,每次1h。
4.根据权利要求1所述的方法,其中步骤1)中的透明操作为加入二甲苯透明,重复两次,每次6-10分钟,观察样本透明情况,待样本全透明后弃去管中二甲苯。
5.根据权利要求1所述的方法,其中步骤1)中的浸蜡操作为在带有样本离心管内加入熔点为62℃石蜡液,置62度烤箱中浸蜡1.5h,中间更换两次石蜡液,每次间隔1.5h。
6.根据权利要求1所述的方法,其中步骤3)还包括待石蜡完全凝固后,去掉包埋底座,将含有微小组织的石蜡块休成四棱台状。
7.根据权利要求1所述的方法,其中步骤3)中,利用电烙铁加热金属包埋框;利用加热过的尖头镊轻轻夹取微小样本,移至包埋框中心位置。
8.根据权利要求1所述的方法,其中步骤4)中,当切至所需样本切片时,先摊平一张切片在镜下观察样本的位置,微调切面,直至切到满意的切面。
9.一种微小组织镜下观察方法,所述的方法包括:
1)制备微小组织石蜡切片;
2)镜下读片;
其中所述的微小组织石蜡切片使用权利要求1-8任一项所述的方法制备;所述的镜下观察方法为非诊断的方法。
10.一种微小组织石蜡切片制备方法在制作病理切片中的应用,其中所述的微小组织石蜡切片的制备方法是采用如权利要求1-8任一项所述的方法制备,所述的应用为非诊断的应用。
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