[发明专利]基于熔解曲线检测结核分枝杆菌复合菌群的方法及试剂盒

权利要求书

1.一种检测结核分枝杆菌复合菌群的多重引物，其特征在于，所述多重引物包括插入序列IS6110、MPB64基因、rpoB基因、katG基因、inhA基因和gyrA基因的特异性引物对；所述特异性引物对的序列为：

F-IS6110：CTCAGCGGATTCTTCGGTCGTGGTC(SEQ ID NO：1)；

R-IS6110：TGAGGTCGCCCGTCTACTTGGTGTT(SEQ ID NO：2)；

F-MPB64：ACATCAGCCTGCCCAGTTACTACCC(SEQ ID NO：3)；

R-MPB64：TCAGCCTGCCACAGCGTGTCATA(SEQ ID NO：4)；

F-rpoB：TGGAGGCGATCACACCGCAGAC(SEQ ID NO：5)；

R-rpoB：GTGCACGTCGCGGACCTCCAGCC(SEQ ID NO：6)；

F-katG：TGGAGCAGATGGGCTTGGG(SEQ ID NO：7)；

R-katG：CCAGCAGGGCTCTTCGTCA(SEQ ID NO：8)；

F-inhA：CGGAAATCGCAGCCACGTTAC(SEQ ID NO：9)；

R-inhA：ACGGGATACGAATGGGGGTTTG(SEQ ID NO：10)；

F-gyrA：GCAATGTTCGATTCCGGCTTCC(SEQ ID NO：11)；

R-gyrA：CGGGCTTCGGTGTACCTCAT(SEQ ID NO：12)。

2.如权利要求1所述的多重引物，其特征在于，所述多重引物还包括插入序列IS6110、MPB64基因、rpoB基因、katG基因、inhA基因和gyrA基因的特异性探针；

优选地，所述特异性探针的序列为：

P-IS6110：CGGCGCACCCACTTACGCCG(SEQ ID NO：13)；

P-MPB64：CTGGAAAATTACATCGCCCAG(SEQ ID NO：14)；

P1-rpoB：CATTGGCACCAGCCAGCTGAGCCAATG(SEQ ID NO：15)；

P2-rpoB：CCTGCTTCATGGACCAGAACAACCCGCTGGCAGG(SEQ ID NO：16)；

P3-rpoB：CCTGCTCGGGGTTGACCCACAAGCGCGCAGG(SEQ ID NO：17)；

P4-rpoB：CCATGGCGACTGTCGGCGCTGCCATGG(SEQ ID NO：18)；

P-katG：CCTGCGGACGCGATCACCAGCGGCAGCAGG(SEQ ID NO：19)；

P-inhA：CCTGCCCCGACAACCTATCGTCTCGCCGCAGG(SEQ ID NO：20)；

P1-gyrA：CGACCGCAGCCACGCCAAGTCGGTC(SEQ ID NO：21)；

P2-gyrA：CCCCGTTCAGTTGCCGAGACCATGGGG(SEQ ID NO：22)；

P3-gyrA：CCTGCCAACTACCACCCGCACGGCGACGCGGCAGG(SEQ ID NO：23)；

P4-gyrA：CCTGCTCGATCTACGACAGCCTGGTGCGGCAGG(SEQ ID NO：24)；

P5-gyrA：CATGGCCCTGCCCTGGTCGCTGCGCCATG(SEQ ID NO：25)。

3.如权利要求2所述的多重引物，其特征在于，所述特异性探针的5’端修饰有荧光基团，选自下组FAM、HEX、ROX、CY5、Cy3、TET、JOE、VIC；所述特异性探针的3’端修饰有淬灭基团，选自下组BHQ、Dabcy1、TAMRA、MGB。