[发明专利]一种GD2嵌合抗原受体及其应用

权利要求书

1.一种人源化的GD2的scFv抗体，其特征在于，所述人源化的GD2的scFv抗体具有结合GD2抗原的活性；

所述人源化的GD2的scFv抗体的氨基酸序列与SEQ ID NO.1具有80％以上的同一性。

2.权利要求1所述的人源化的GD2的scFv抗体的衍生抗体结合物。

3.核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的人源化的GD2的scFv抗体或权利要求2所述的人源化的GD2的scFv抗体的衍生抗体结合物；

优选地，所述核酸分子的核苷酸序列与SEQ ID NO.2具有80％以上的同一性。

4.GD2嵌合抗原受体，其特征在于，所述GD2嵌合抗原受体经过人源化改造，包括GD2抗原结合scFv结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区、CD3ζ信号传导结构域和可诱导自杀融合结构域；

所述GD2抗原结合scFv结构域包括权利要求1所述的人源化的GD2的scFv抗体或权利要求2所述的人源化的GD2的scFv抗体的衍生抗体结合物；

优选地，所述跨膜结构域包括CD28跨膜结构域和/或CD8α跨膜结构域；

优选地，所述共刺激信号传导区包括CD28和CD27信号结构传导区或CD28和IL-15Ra信号结构传导区；

优选地，所述CD28和CD27信号结构传导区的氨基酸序列与SEQ ID NO.3具有90％以上的同一性；

优选地，所述CD28和IL-15Ra信号结构传导区的氨基酸序列与SEQ ID NO.4具有90％以上的同一性；

优选地，所述可诱导自杀融合结构域包括胱天蛋白酶9结构域；

优选地，所述胱天蛋白酶9结构域的氨基酸序列与SEQ ID NO.5具有90％以上的同一性；

优选地，所述GD2嵌合抗原受体还包括信号肽和/或2A序列；

优选地，所述信号肽包括Secretory信号肽；

优选地，所述GD2嵌合抗原受体包括Secretory信号肽、GD2抗原结合scFv结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区、CD3ζ信号传导结构域、2A序列和可诱导自杀融合结构域。

5.核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求4所述的GD2嵌合抗原受体。

6.病毒载体，其特征在于，所述病毒载体含有至少一个拷贝的权利要求5所述的核酸分子；

优选地，所述病毒载体包括慢病毒载体或逆转录病毒载体，优选为慢病毒载体。

7.重组病毒，其特征在于，所述重组病毒为权利要求6所述的病毒载体与包装辅助质粒共转染哺乳动物细胞包装得到；

优选地，所述包装辅助质粒包括pNHP和pHEF-VSVG；

优选地，所述哺乳动物细胞包括293细胞、293T细胞或TE671细胞中的任意一种。

8.嵌合抗原受体T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体T细胞表达权利要求4所述的GD2嵌合抗原受体；

优选地，所述嵌合抗原受体T细胞为将权利要求5所述的核酸分子转染到免疫细胞中制备得到；

优选地，所述转染的方式包括通过病毒载体、通过真核表达质粒或通过mRNA中的任意一种，优选为通过病毒载体；

优选地，所述嵌合抗原受体T细胞为通过病毒载体将权利要求5所述的核酸分子转染到T细胞中制备得到。

9.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括权利要求1所述的人源化的GD2的scFv抗体、权利要求2所述的人源化的GD2的scFv抗体的衍生抗体结合物、权利要求4所述的GD2嵌合抗原受体、权利要求7所述的重组病毒或权利要求8所述的嵌合抗原受体T细胞中的任意一种或至少两种的组合。

10.权利要求1所述的人源化的GD2的scFv抗体、权利要求2所述的人源化的GD2的scFv抗体的衍生抗体结合物、权利要求4所述的GD2嵌合抗原受体、权利要求7所述的重组病毒、权利要求8所述的嵌合抗原受体T细胞或权利要求9所述的组合物中的任意一种或至少两种的组合在制备肿瘤治疗药物中的应用；

优选地，所述肿瘤包括GD2特异抗原表达的肿瘤；

优选地，所述肿瘤包括GD2特异抗原表达的神经系统肿瘤；

优选地，所述肿瘤包括神经母细胞瘤。