[发明专利]一种淋巴细胞染色体核型制片方法

权利要求书

1.一种淋巴细胞染色体核型制片方法，其特征在于，包括：

在新鲜采集的血样中添加抗凝剂，所述抗凝剂由肝素钠和纤溶酶组成；

将含有抗凝剂的所述血样接种培养；

利用低渗液处理所述血样接种培养的培养液，所述低渗液为丙三醇和KCl混合溶液；

将经所述低渗液处理的细胞沉淀用核型固定液固定制片，所述核型固定液为在卡诺氏固定液中添加二甲基亚砜形成。

2.根据权利要求1所述的一种淋巴细胞染色体核型制片方法，其特征在于，所述肝素钠的添加量为10～20IU/mL，所述纤溶酶的添加量为0.1～0.5IU/mL。

3.根据权利要求1所述的一种淋巴细胞染色体核型制片方法，其特征在于，所述丙三醇体积浓度为3％～8％，所述KCl浓度为0.05～0.1mol/L。

4.根据权利要求1所述的一种淋巴细胞染色体核型制片方法，其特征在于，所述述二甲基亚砜占核型固定液的体积浓度为1％～10％。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的一种淋巴细胞染色体核型制片方法，其特征在于，包括：

在采集的外周静脉血样中加入抗凝剂，接种至培养基中培养；

培养终止前加入秋水仙素，使血样中淋巴细胞停止于有丝分裂中期；

收集细胞培养液，离心去上清；

收集细胞沉淀加入预热的低渗液滴管吹打均匀，低渗处理后离心取细胞沉淀；

在细胞沉淀中加入核型固定液，滴管吹匀固定，离心去上清；重复固定多次；

根据细胞沉淀的多少加入核型固定液，吹打细胞制成微白色悬液；

用滴管吸取细胞悬液，于载玻片垂直上方滴片，烘干。

6.根据权利要求5所述的一种淋巴细胞染色体核型制片方法，其特征在于，所述秋水仙素处理时间为2～4h。

7.根据权利要求5所述的一种淋巴细胞染色体核型制片方法，其特征在于，所述低渗液处理温度为37℃，处理时间5～10min。

8.根据权利要求5所述的一种淋巴细胞染色体核型制片方法，其特征在于，所述固定液在使用前在室温条件下进行预处理。