[发明专利]一种生产7-O甲基圣草酚的重组大肠杆菌及应用

权利要求书

1.一种重组大肠杆菌，其特征在于，在大肠杆菌中表达来源于Perilla frutescens的甲氧基转移酶的编码基因。

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌中过表达编码高丝氨酸琥珀酰转移酶的基因和编码L-丝氨酸-O乙酰转移酶的基因。

3.根据权利要求2所述的重组大肠杆菌，其特征在于，表达来源于枯草芽孢杆菌的ATP核糖体感应开关ydaO基因。

4.根据权利要求1～3任一所述的重组大肠杆菌，其特征在于，在大肠杆菌中表达来源于酿酒酵母的编码5’-磷酸吡哆醛合成酶的基因、编码DNA结合蛋白的基因、编码核糖体亚单位的基因。

5.生产7-O甲基圣草酚的方法，其特征在于，利用权利要求1～4任一所述的重组大肠杆菌发酵生产7-O甲基圣草酚。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将所述重组大肠杆菌接种至发酵体系中培养至OD₆₀₀为0.8±0.1，加入终浓度为0.1～0.2mM的IPTG，在20～25℃，180～220r/min下诱导8～10h，再加入终浓度为200～250mg/L的圣草酚，再反应8～10h。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将所述重组大肠杆菌接种至发酵体系中培养至OD₆₀₀为0.8±0.1，加入终浓度为0.1～0.2mM的IPTG，在20～25℃，180～220r/min下诱导2～3h，再加入200～250mg/L的圣草酚，反应8～10h后再加入等量的圣草酚，再次反应8～10h。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将权利要求1所述重组大肠杆菌在发酵体系中培养至OD₆₀₀为0.8±0.1，加入终浓度为0.1～0.2mM的IPTG，在20～25℃、180～220r/min下诱导8～10h，再加入200～250mg/L的圣草酚并同时添加终浓度为0～135μM的5’-磷酸吡哆醛，反应8～10h。

9.根据权利要求5～8任一所述的方法，其特征在于，所述发酵体系中含有3～5g/L甘油，10～12g/L蛋白胨，20～24g/L酵母提取物，2～2.5g/L K₂HPO₄，15～20g/L K₂HPO₄。

10.权利要求1～4任一所述重组大肠杆菌在生产7-O甲基圣草酚及其衍生物中的应用。