[发明专利]SRSF5结合蛋白的PCR检测试剂盒及检测方法在审
申请号: | 202210185587.2 | 申请日: | 2022-02-28 |
公开(公告)号: | CN114317836A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 余树芳;袁旦一;陈斌;何谦;辜良斌;李晓琪;张丹 | 申请(专利权)人: | 成都纳比微特检测技术服务有限公司;成都纳比生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 重庆乐泰知识产权代理事务所(普通合伙) 50221 | 代理人: | 林慰敏 |
地址: | 610200 四川省成都市天府新区*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | srsf5 结合 蛋白 pcr 检测 试剂盒 方法 | ||
1.SRSF5结合蛋白的PCR检测试剂盒,其特征在于:包括上游引物SRSF5-F和下游引物SRSF5-R,核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述的SRSF5结合蛋白的PCR检测试剂盒,其特征在于:试剂盒还包括:Green Realtime PCR Master Mix,模板cDNA和无菌水。
3.根据权利要求2所述的SRSF5结合蛋白的PCR检测试剂盒,其特征在于:所述的Green Realtime PCR Master Mix的组成包括:dNTPs、MgCl2、Taq DNA多聚酶、抗Taq单克隆抗体。
4.根据权利要求2所述的SRSF5结合蛋白的PCR检测试剂盒,其特征在于:具体的组成为:每20uL反应液中包含了:Green Realtime PCR Master Mix 10μL,上游引物0.8-1.0μL,下游引物0.8-1.0μL,模板RNA 2.0-3.0μL,余量为无菌水;所述上游引物和下游引物的浓度均为10pmol/μL。
5.权利要求1-4任一项所述的SRSF5结合蛋白的实时荧光定量PCR检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
a、用RNA提取试剂盒从待检样品中提取RNA;
b、将提取的RNA与流感病毒生命周期中关键RNA结合蛋白SRSF5的实时荧光定量PCR检测试剂盒中的试剂混合,进行qPCR反应;
c、反应结束后及时进行结果判读。
6.根据权利要求5所述的SRSF5结合蛋白的实时荧光定量PCR检测方法,其特征在于:步骤a中所述的待检样品包括:宿主的血液或组织样品。
7.根据权利要求5所述的SRSF5结合蛋白的实时荧光定量PCR检测方法,其特征在于:步骤b所述的qPCR反应的条件为:55℃15min;95℃30s;95℃10s;60℃30s后两步进行40个循环。
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