[发明专利]用于三维培养纤维网状结构多肽及其应用有效
申请号: | 202210182580.5 | 申请日: | 2022-02-25 |
公开(公告)号: | CN114478706B | 公开(公告)日: | 2023-08-01 |
发明(设计)人: | 黄璘;聂盼;万源 | 申请(专利权)人: | 重庆嘉士腾生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K7/08 | 分类号: | C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04;C12N5/09;C12N5/071;C12Q1/02 |
代理公司: | 重庆航图知识产权代理事务所(普通合伙) 50247 | 代理人: | 王贵君 |
地址: | 401120 重庆市两江新区大竹林街道金*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 三维 培养 纤维 网状结构 多肽 及其 应用 | ||
1.用于三维培养纤维网状结构多肽,其特征在于:所述多肽的氨基酸序列如为Arg GlnGlu Thr Arg Gln Glu Thr Arg Gln Glu Thr Arg Gln Glu Thr。
2.权利要求1所述多肽在用于肺癌细胞三维培养中的应用。
3.基于权利要求1所述多肽建立肺癌类器官的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将获得的肺癌组织制备成单细胞悬液;
将步骤(1)制备的单细胞悬液加入权利要求1所述多肽重悬,然后接种于培养装置中,加入培养基,培养箱中扩大培养。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述肺癌组织来源于哺乳动物。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述肺癌组织制备成单细胞悬液具体过程是经过剪碎、研磨、过滤得到。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述培养基为含有如下组分的DMEM/F12完全培养基:雌二醇、氢化可的松、R-Spondin 3、Neuregulin 1、rh-EGF、Noggin、A83-01、Wnt3a、Y-27632、SB202190、B27、N -乙酰半胱氨酸、烟酰胺、GlutaMax、胎牛血清、青霉素/链霉素双抗。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述培养基组分的浓度如下:雌二醇10nM-1000nM、氢化可的松0.1-100μg/ml、R-Spondin 3 100-500ng/ml、Neuregulin 1 1-10nM、rh-EGF 1-10ng/ml、Noggin 50-500ng/ml、A83-01 100-1000nM、Wnt3a 1-5nM、Y-27632 1-10μM、SB202190 100-1000ng/ml、B27 10ng/ml、N -乙酰半胱氨酸1-5nM、烟酰胺1-10nM、GlutaMax 1-5nM、胎牛血清体积分数10%、青霉素/链霉素双抗体积分数1%。
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