[发明专利]293细胞的转染方法

权利要求书

1.293细胞的转染方法，其特征在于，包括以下步骤：

将293细胞与待转染物质混合，进行流式电转转染，所述流式电转转染的电压值为100V～300V，脉冲值为1000μs～5000μs，电击次数为1～10次，间隔为100ms～600ms，转染液流速为1mL/min～10mL/min，转染时的所述293细胞的细胞密度为1×10⁵cells/mL～5×10⁷cells/mL；

将转染后的293细胞接种到转染培养基进行培养，所述转染培养基中含有L-酪氨酸、烟酰胺、硫酸镁和氢化可的松。

2.根据权利要求1所述的293细胞的转染方法，其特征在于，所述流式电转转染的电压值为160V～250V，脉冲值为1000μs～2000μs，电击次数为3～6次，间隔为200ms～400ms，转染液流速为3.5mL/min～5.5mL/min。

3.根据权利要求1所述的293细胞的转染方法，其特征在于，转染时的所述293细胞的细胞密度为1×10⁶cells/mL～5×10⁷cells/mL。

4.根据权利要求1所述的293细胞的转染方法，其特征在于，所述转染培养基为无血清转染培养基，所述转染培养基包含如下浓度的组分：

L-酪氨酸0.1843g/L～0.396g/L、

天冬酰胺0.1704g/L～0.1874g/L、

L-胱氨酸0.3361g/L～0.3697g/L、

L-谷氨酸0.1722g/L～0.1895g/L、

异亮氨酸0.1052g/L～0.1157g/L、

亮氨酸0.1322g/L～0.1454g/L、

甲硫氨酸0.0903g/L～0.0993g/L、

苯丙氨酸0.0940g/L～0.1034g/L、

脯氨酸0.0521g/L～0.0573g/L、

丝氨酸0.0940g/L～0.1034g/L、

苏氨酸0.1518g/L～0.1669g/L、

色氨酸0.4255g/L～0.4680g/L、

缬氨酸0.1508g/L～0.1659g/L、

氯化胆碱0.0010g/L～0.0011g/L、

葡萄糖5.5860g/L～6.1446g/L、

烟酰胺0.0014g/L～0.0016g/L、

核黄素0.00015g/L～0.00025g/L、

维生素B12 0.0009g/L～0.0010g/L、

吡哆醛0.0112g/L～0.0123g/L、

盐酸硫胺素0.0033g/L～0.0036g/L、

生物素0.00025g/L～0.00035g/L、

肌醇0.0009g/L～0.0010g/L、

氯化钾0.2346g/L～0.2581g/L、

氯化镁0.1080g/L～0.1188g/L、

硫酸镁0.0200g/L～0.0369g/L、

磷酸二氢钠0.0205g/L～0.0225g/L、

磷酸氢二钠0.0326g/L～0.0358g/L、

碳酸氢钠1.8732g/L～2.0605g/L、

七水硫酸锌0.00055g/L～0.00065g/L、

亚油酸0.00015g/L～0.00025g/L、

亚硒酸钠0.00025g/L～0.00035g/L、

氢化可的松0.0001g/L～0.0002g/L、

硫辛酸0.0003g/L～0.0004g/L、

丙酮酸钠0.0633g/L～0.0696g/L。