[发明专利]一种人源膜联蛋白人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构及其解析方法在审
| 申请号： | 202210178427.5 | 申请日： | 2022-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN114437197A | 公开（公告）日： | 2022-05-06 |
| 发明（设计）人： | 华子春;唐薇 | 申请（专利权）人： | 江苏靶标生物医药研究所有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;G16C20/50 |
| 代理公司： | 江苏银创律师事务所 32242 | 代理人： | 何震花 |
| 地址： | 213000 江苏省常州市武进区常*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 人源膜联 蛋白 a5 突变体 二聚体 晶体结构 及其 解析 方法 | ||
1.一种人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构，其特征在于：所述的人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构，其特征在于：所述的人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构的一个晶格由4个蛋白分子组成，分别为：chain A、chain B、chain C、chain D；所述的蛋白晶体每个单分子含有4个repeat，所述的每个repeat由5个α螺旋和连接它们的loop组成。
3.根据权利要求2所述的人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构，其特征在于：所述的每个repeat由约70个氨基酸组成的5个α螺旋和连接其的loop组成，属于一种典型的膜联蛋白Annexins家族类蛋白。
4.根据权利要求2所述的人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构，其特征在于：所述的人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构的晶型外形为块状晶体，空间群为P21212；所述的人源膜联蛋白TP25S的晶体结构的晶胞参数为a为b为c为α＝β＝γ＝90°。
5.根据权利要求2或3所述的人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构，其特征在于：所述的chain A-chain D，chain B-chain C，chain C-chain A之间形成强分子间作用力。
6.权利要求1至5任一项所述的人源膜联蛋白人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构的解析方法，其特征在于包括如下步骤：从母液中可以获得晶体，利用液态氮气流快速冷冻，在100K下利用X射线源获得的晶体数据，具体过程如下：
首先使用的尼龙晶体环，从晶体浸泡液中获取适宜X射线衍射的晶体，并迅速使用冷却系统产生的低温氮气流中冷冻至零下150-180℃；使X射线通过晶体，利用旋进法收集X射线衍射数据；收集到晶体的X射线衍射数据后，按照下述步骤进行相应的数据处理：(1)使用HKL2000等软件对上一步骤中收集得到的衍射数据进行处理，获得完整的数据文件；(2)使用CCP4程序包中的Phaser、Molrep软件，利用分子置换方法，以已知的膜联蛋白的结构为搜索模型，制得人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构。
7.权利要求1至5任一项所述的人源膜联蛋白人源膜联蛋白A5突变体二聚体的晶体结构在制备检测试剂、诊断试剂盒、药物靶点筛选和治疗药物中的应用。
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