[发明专利]一种修饰细胞外囊泡的试剂及制备方法有效
| 申请号： | 202210164997.9 | 申请日： | 2022-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN114225044B | 公开（公告）日： | 2023-01-31 |
| 发明（设计）人： | 葛啸虎;王达;董凤伟;陆路;马德美;王淼;程国钢;白云飞;韩春乐;陈宁 | 申请（专利权）人： | 天九再生医学（天津）科技有限公司 |
| 主分类号： | A61K47/54 | 分类号： | A61K47/54;A61K49/00;A61K31/704;A61K31/7008;A61K47/51;A61P35/00 |
| 代理公司： | 天津诺德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 12213 | 代理人： | 栾志超;王旭 |
| 地址： | 300457 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 修饰 细胞 外囊泡 试剂 制备 方法 | ||
1.一种修饰细胞外囊泡的方法，其特征在于：将式2化合物与细胞外囊泡混合孵育；
式2；
其中，4≤n≤14且n为偶数，R为修饰物；
修饰物为小分子化合物，所述小分子化合物为荧光探针或化学药物；
其中，先叠氮化修饰修饰物，再将叠氮化的修饰物与经过羧基活化的二苯环辛炔酸点击化学偶联，形成式2所示修饰细胞外囊泡的试剂；然后将含有修饰物的式2化合物与细胞外囊泡混合孵育使其连接在细胞外囊泡上。
2.根据权利要求1所述的修饰细胞外囊泡的方法，其特征在于：修饰物为荧光探针，具体为罗丹明110-叠氮化物或TAMRA-叠氮化物；
或者，修饰物为化学药物，具体为多柔比星。
3.根据权利要求1所述的修饰细胞外囊泡的方法，其特征在于：碳二亚胺与N-羟基琥珀酰亚胺组成的交联剂活化二苯环辛炔酸的羧基，获得二苯环辛炔琥珀酰亚胺酯。
4.根据权利要求3所述的修饰细胞外囊泡的方法，其特征在于：碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺和二苯环辛炔酸的摩尔比为1-1.1:1-1.3:1。
5.根据权利要求4所述的修饰细胞外囊泡的方法，其特征在于：所述碳二亚胺为二环己基碳二亚胺或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；
所述二苯环辛炔酸结构式为：
式1；
其中，4≤n≤14且n为偶数。
6.根据权利要求1所述的修饰细胞外囊泡的方法，其特征在于：孵育条件为以超纯水、生理盐水或PBS缓冲液为溶剂，25-37 ℃反应0.5-1 h。
7.根据权利要求1所述的修饰细胞外囊泡的方法，其特征在于：制备得到修饰后的细胞外囊泡后通过离心分离纯化，离心条件为20-25 ℃，10000-12000 g离心50-100 min。
8.根据权利要求1所述的修饰细胞外囊泡的方法，其特征在于：细胞外囊泡为来源于奶源、血液、尿液或干细胞的细胞外囊泡。
9.由权利要求1-8中任一所述的修饰细胞外囊泡的方法制备得到的修饰后的细胞外囊泡。
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