[发明专利]一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 202210151323.5 | 申请日： | 2022-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN114592088A | 公开（公告）日： | 2022-06-07 |
| 发明（设计）人： | 高立;高玉龙;王笑梅;李凯;祁小乐;刘长军;张艳萍;崔红玉 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 马鑫 |
| 地址： | 150009 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 区分 禽呼肠孤 病毒 不同 基因型 多重 pcr 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒(Avian reovirus，ARV)4种不同基因型的多重PCR引物组，其特征在于，所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物mGC-F，和分别用于扩增ARV-Ⅰ、ARV-Ⅰ-sub、ARV-Ⅱ以及ARV-Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物mGC1-R、mGC1-sub-R、mGC2-R以及mGC5-R组成，其中上游引物mGC-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，4条特异性下游引物mGC1-R、mGC1-sub-R、mGC2-R以及mGC5-R的核苷酸序列分别如SEQ IDNO.2-5所示。
2.权利要求1所述的多重PCR引物组在制备检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的试剂中的用途，所述的ARV 4种不同基因型包括ARV-Ⅰ、ARV-Ⅰ-sub、ARV-Ⅱ以及ARV-Ⅴ。
3.一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有权利要求1所述的多重PCR引物组。
4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型时，其反应体系为25.0μL，包括Ex Taq预混酶12.5μL，上游引物mGC-F 1.0μL，下游引物mGC1-R 1.0μL、下游引物mGC1-sub-R 1.5μL、下游引物mGC2-R 1.0μL、下游引物mGC5-R 1.5μL，cDNA2.0μL，ddH2O4.5μL。
5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，上游引物以及下游引物的浓度均为10μm/μL。
6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型时，其反应程序为：95℃ 5min预变性，95℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸50s，35个循环，然后在72℃延伸10min。
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