[发明专利]一种用于化妆品白细胞提取物及其冻干粉的制备方法

权利要求书

1.一种用于化妆品白细胞提取物的制备方法，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：

S1：采集健康的脐带血，并采用血液分析仪进行培养，对培养后的脐血进行CIK细胞计数；

S2：用淋巴细胞分离液分离单个核细胞；

S3：把所得单核细胞悬浮在CIK细胞无血清培养液中，形成混合液；

S4：在步骤S3所得的混合液中添加添加IL-2、干扰素与CD3单抗，并在CO2孵箱中通过37℃的温度培养14-18天，得到最终培养液；

S5：将步骤S4收集到最终培养的上清液经过3000r，20min离心去细胞碎片及颗粒，再进行10KD超滤,最终获得白细胞提取物。

2.根据权利要求1所述的一种用于化妆品白细胞提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中的无血清培养液是无血清、不含酚红的培养液。

3.根据权利要求1所述的一种用于化妆品白细胞提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中培养的脐血CIK细胞每升≥3×1010个。

4.根据权利要求1所述的一种用于化妆品白细胞提取物冻干粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)澄清：白细胞提取物在4℃3000rpm的条件下离心20min，并收集上清液；

(2)加入辅料：在收集的上清液中加入5％-15％的甘露醇进行混匀；

(3)除菌：将步骤(2)所得溶液经过0.2μm的滤膜进行除菌过程；

(4)分装：将除菌后的溶液分装在玻璃瓶中，液面不超过西林瓶1cm；

(5)冻干：将含改溶液的西林瓶置于-25℃的无菌条件下进行预冻，预冻至上清液凝固；

(6)升华干燥：将凝固的上清液抽真空，进行升华干燥；

(7)除冰密封：干燥后的上清液除去冰晶后进行粉碎，最后加塞加盖，进行密封；

(8)保存：于4℃保存冻干粉。