[发明专利]丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用

说明书

本发明公开了丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，包括以下步骤：步骤一：实验材料准备：从昆明医科大学动物实验中心获取60只balb/c小鼠作为实验对象；步骤二：实验试剂准备：(200、100、50mg·kg^‑1)糙苏醇提物溶液，本发明通过采用对小鼠灌胃糙苏醇提物溶液、生理盐水溶、阿司匹林，并分离受试小鼠的肺和肝脏，一方面经石蜡切面，通过对取样的肝肺组织采用常规HE染色，在光学显微镜下观察肝和组织病理学变化，另一方面通过用ELISA试剂盒测定血清、肺匀浆以及肝匀浆中TNF‑α、IL‑6和MCP‑1含量，以此方式能够通过检测数据结果直观的观察出丽江糙苏对小鼠肺叶和肝脏组织的作用效果，从而获取丽江糙苏对抑制炎症的作用。

技术领域

本发明属于药物研制技术领域，具体涉及丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用。

背景技术

内毒素血症是由于血中细菌或病灶内细菌释放出大量内毒素至血液，或输入大量内毒素污染的液体而引起的一种病理生理表现。内毒素血症分为内源性和外源性两大类。内毒素血症临床症状主要决定于宿主对内毒素的抵抗力。症状和体征有：发热，白细胞数变化，出血倾向，心力衰竭、肾功能减退、肝脏损伤、神经系统症状，以及休克等。内毒素血症可以出现在多系统的多种疾病中，通常导致致死性感染性休克、多器官功能衰竭、弥漫性血管内凝血等，病死率极高。

据资料表明丽江糙苏具有一定药效功能，但是现有药物研究技术中并未有相关丽江糙苏对于治疗内毒素血症的药效功能研究，从而无法了解丽江糙苏对治疗内毒素血症的作用效果，因此需要对丽江糙苏对治疗内毒素血症进行研究，为相关抗炎镇痛药研发提供基础理论。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，包括以下步骤：

步骤一：实验材料准备，从昆明医科大学动物实验中心获取60 只balb/c小鼠作为实验对象。

步骤二：实验试剂准备，(200、100、50mg·kg^-1)糙苏醇提物溶液(1ml/100g)、生理盐水溶(1ml/100g)、阿司匹林(80 mg·kg^-1)、0.9％氯化钠、LPS(17mg·kg^-1)溶液、福尔马林溶液、 4％多聚甲醛溶液若干份。

步骤三：实验方法，将实验小鼠随机均分为模型组、正常组、阳性药组、糙苏醇提物高、中、低剂量组共6组(每组10只)，将实验小鼠放置在适宜环境下培养，一周后，分别灌胃糙苏醇提物溶液、生理盐水溶、阿司匹林，24h后眼球采血处死，并分离受试小鼠的肺和肝脏。

步骤四：病理切片处理，取小鼠右肺中叶及肝同一叶于4％多聚甲醛溶液中，其其余肝肺组织自封袋包装，先放置液氮中，再转移到 -80℃冰箱低温条件下保存备用，将肝肺组织从福尔马林溶液中取出，经石蜡切面，通过对取样的肝肺组织采用常规HE染色，在光学显微镜下观察肝和组织病理学变化。

步骤五：炎性因子检测，用ELISA试剂盒测定血清、肺匀浆以及肝匀浆中TNF-α、IL-6和MCP-1含量。

步骤六：总结实验结果，根据实验测定结果确定丽江糙苏作用效果。

优选的，所述步骤一中，实验材料选用年龄为6-8周龄、体重18～ 22g的健康雄性小鼠。

优选的，所述步骤三中，模型组小鼠灌胃生理盐水(1ml/100g) (均用5％吐温-80溶解)，正常组小鼠灌胃生理盐水溶液 (1ml/100g)，阳性药组小鼠灌胃药阿司匹林(80mg·kg^-1)，糙苏醇提物高、中、低剂量组小鼠分别按200、100、50mg·kg^-1剂量灌胃糙苏醇提物溶液(1ml/100g)。