[发明专利]增强LGI1免疫荧光的方法、LGI1抗体的免疫荧光检测方法及应用有效
| 申请号： | 202210135752.3 | 申请日： | 2022-02-15 |
| 公开（公告）号： | CN114438125B | 公开（公告）日： | 2023-02-03 |
| 发明（设计）人： | 闫亚平;赵子越;郝文斌;陈倩文;刘龙月;李科 | 申请（专利权）人： | 陕西脉元生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;G01N33/564;G01N33/58;G01N33/569 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 苏士莹 |
| 地址： | 710311 陕西省西安市高新区草堂科技产业基地秦*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 增强 lgi1 免疫 荧光 方法 抗体 检测 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种以非诊断目的的LGI1的免疫荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
将编码LGI1的DNA片段插入至表达载体，提取质粒得到LGI1重组表达质粒；
将编码ADAM23的DNA片段插入至表达载体，提取质粒得到ADAM23重组表达质粒；
将所述LGI1重组表达质粒和所述ADAM23重组表达质粒同时转染入细胞中，细胞培养后进行免疫荧光染色；
所述ADAM23重组表达质粒和所述LGI1重组表达质粒的质量比为1:5~59；
所述转染为PEI转染；
所述LGI1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述ADAM23的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
2.根据权利要求1所述的免疫荧光检测方法，其特征在于，所述表达载体包括真核载体。
3.根据权利要求1所述的免疫荧光检测方法，其特征在于，所述细胞培养的温度为37℃，时间为48h。
4.根据权利要求1所述的免疫荧光检测方法，其特征在于，所述编码LGI1的DNA片段和编码ADAM23的DNA片段分别通过PCR扩增方法获得。
5.根据权利要求1所述的免疫荧光检测方法，其特征在于，所述PEI和所述LGI1重组表达质粒的体积质量比为1:2~4。
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