[发明专利]一种基于生物效应的昆仙胶囊质量控制方法与应用

说明书

本发明提供了一种基于生物效应的昆仙胶囊质量控制方法与应用，主要包括如下步骤：昆仙胶囊样品乙醇提取物的制备；采用斑马鱼对昆仙胶囊样品乙醇提取物进行生物效应检测，用药浓度以昆仙胶囊样品浓度为7μg/ml为标准；昆仙胶囊样品生物效应检测结果：统计斑马鱼节间血管总长度为1800‑2400μm的昆仙胶囊样品为合格样品；本发明首次建立了昆仙胶囊基于生物效应的质量检查方法，并且有效避免了依据生物效应检测中出现误判的情况，对昆仙胶囊以化学成分为检测指标的现行标准提供了重要补充，尤其是对昆仙胶囊缺方、减方样品的检测，提供了一种有效的生物检测方法。

技术领域

本发明属于中成药质量控制技术领域，具体涉及一种基于生物效应的昆仙胶囊质量控制方法与应用。

背景技术

“昆仙胶囊”是由昆明山海棠、淫羊藿、枸杞和菟丝子组成，具有祛风除湿、补肾通络的作用，主要用于治疗类风湿关节炎等疾病。昆明山海棠是卫矛科雷公藤属有毒木质藤本植物，虽然昆明山海棠有较强的抗炎和免疫抑制活性，但会导致昆仙胶囊具有生殖毒性等不良反应。昆仙胶囊具有现行质量标准为国家食品药品监督管理局国家药品标准YBZ07522006-2009Z。现行质量标准包括性状、鉴别、检查、含量测定等项目。鉴别项主要包括淫羊藿苷和枸杞子鉴别方法。含量测定以雷公藤甲素和淫羊藿苷的含量为指标。现行药品质量控制体系并未涵盖昆仙胶囊处方全部药味的控制，质量控制指标较为单一，只检测了2个化合物，不能准确评价昆仙胶囊的整体质量，当昆仙胶囊出现减方、缺方等不合格样品时，仅靠化学方法检测，容易出现误判。

昆仙胶囊具有祛风除湿、补肾通络的作用，主要用于治疗类风湿关节炎等疾病，临床应用广泛。类风湿关节炎是多系统自身免疫性疾病，病理表现为滑膜增生、血管翳形成以及逐渐出现的关节软骨和骨破坏等。类风湿关节炎开始于滑膜内膜及内膜下层，随着炎症细胞的迁移、浸润及细胞层数增加，滑膜组织中出现新生血管，新生血管可释放多种炎症因子侵害骨关节和关节软骨。所以血管新生是类风湿关节炎的重要病理过程。有效抑制血管新生可阻止血管翳的形成，减轻类风湿关节炎症状。

中国文献《斑马鱼高血脂模型在山青之片质量控制中的应用研究》(郭殿武，周娟等，中国药品标准2013年第14卷第4期)记载了用高脂肪饮食诱导的斑马鱼高血脂模型对山青之片进行生物活性评价和质量稳定性检测，该文献中评价的山青之片主要含有赤芍提取物和党参提取物；成分组成简单，且不含有毒性较大的中药成分；本领域技术人员由该文献公开的内容无法预期斑马鱼模型在含有中药成分复杂、且含有毒性较大中药成分的中药中的应用。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种基于生物效应的昆仙胶囊质量控制方法与应用。

本发明提供了一种能够有效判断昆仙胶囊质量的方法。

本发明为处方复杂且具有多种功能主治的中成药，基于生物效应的质量控制研究提供了新思路与方法。

术语说明：

(1)节间血管(Intersegmental vessels，ISV)。

(2)相对标准方差(Relative Standard Deviation，RSD)。

(3)昆明山海棠(Tripterygium hypoglaucum(Lévl.)Hutch，THH)。

(4)昆仙胶囊(Kun Xian capsule，KX)。

(5)小时(hours，h)。

(6)hpf(hours post fertilization)：生物学专用术语，指受精后的时间。如24hpf指受精后24小时的胚胎。

(7)20210622：指实验的时间。如20210622指2021年6月22日。

(8)PTK787：酪氨酸激酶抑制剂。作为抑制血管生成实验的阳性药。