[发明专利]一种白玉蜗牛多糖及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种具有如下所示二糖重复单元结构的多糖WJPS：

→4)-α-L-IdoA2S-(1→4)-α-D-GlcNAc-(1→

所述多糖WJPS的重均分子量为409KDa，分子量范围为350～450KDa。

2.一种制备权利要求1所述的多糖WJPS的方法，包括从白玉蜗牛中进行分离提取以及纯化得到多糖WJPS的步骤。

3.根据权利要求1所述的方法，其包括如下步骤：

S1，将去壳白玉蜗牛脱脂、干燥、粉碎后用木瓜蛋白酶酶解；

S2，终止酶反应，离心收集上清液，并将上清液透析48-72小时；

S3，将透析后溶液加入2-3倍体积的无水乙醇，静置使得多糖沉淀，离心收集沉淀，烘干后得到粗多糖；

S4，将粗多糖用水溶解后加到平衡后的DEAE-纤维素柱层析，之后用浓度梯度为0.1M、0.2M、0.3M、0.5M、0.8M、1.5M、3M氯化钠溶液作为洗脱液逐步洗脱色谱柱，将用0.8M氯化钠溶液洗脱得到的多糖洗脱液用蒸馏水透析，冻干得到多糖WJPS。

4.根据权利要求3所述的方法，

其中，S1中，所述脱脂为将去壳白玉蜗牛用95％乙醇水溶液浸泡16-20小时后，再两次使用丙酮浸泡16-20小时；和/或

其中，S1中，所述干燥为鼓风干燥机60℃干燥24小时，或者室温下通风橱晾干一周；和/或

其中，S1中，所述酶解为将经脱脂、干燥、粉碎的白玉蜗牛加入到木瓜蛋白酶消化缓冲液中，再加入木瓜蛋白酶进行酶解，其中，所述木瓜蛋白酶消化缓冲液的pH为5.5，配方为50mM醋酸钠,5mM EDTA,5mM L-半胱氨酸，和/或，其中，木瓜蛋白酶消化缓冲液体积用量约为15mL/g白玉蜗牛干燥粉碎后组织干重，和/或，其中，木瓜蛋白酶与干燥粉碎的白玉蜗牛组织的重量比为15～25mg酶/g组织，优选为20mg酶/g组织，优选地，木瓜蛋白酶可以一次加入或多次加入，例如，将经脱脂、干燥、粉碎的白玉蜗牛加入到木瓜蛋白酶消化缓冲液中，搅拌均匀后按照每g干燥粉碎的组织加入20mg木瓜蛋白酶的比例加入木瓜蛋白酶，轻柔震荡酶解24-48小时，再加入相同量的木瓜蛋白酶，继续轻柔震荡酶解24-48小时。

5.根据权利要求3所述的方法，

其中，S2中，通过加热至80-100℃20-40分钟终止酶反应，在4℃条件下，离心收集上清液，并将上清液透析48-72小时；优选地，离心转速为8000～12000转/分钟，离心时间为20-40分钟；还更优选地，所述透析为对流动水透析；和/或

其中，S3中，将透析后溶液经浓缩后加入2-3倍体积的无水乙醇。

6.一种药物组合物，其包含有效剂量的如权利要求1所述的多糖WJPS作为有效成分，优选地进一步含有药学上可接受的载体及辅料。

7.一种可食用组合物，其包含有效剂量的如权利要求1所述的多糖WJPS作为有效成分，优选地进一步含有食品上可接受的载体及辅料。

8.根据权利要求6所述的药物组合物，还包含其他药物活性成分。

9.如权利要求1所述的多糖WJPS或如权利要求6所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗神经退行性疾病(特别是β淀粉样蛋白在脑部异常沉积所引起的神经退行性疾病，例如，阿尔兹海默症)的药物中的用途。

10.如权利要求1所述的多糖WJPS或如权利要求7所述的可食用组合物在制备辅助改善记忆功能的保健品中的用途。