[发明专利]新型CRISPR-Cas9抑制蛋白及其改造应用于化学可控的基因编辑的方法有效
| 申请号： | 202210127749.7 | 申请日： | 2022-02-11 |
| 公开（公告）号： | CN114525293B | 公开（公告）日： | 2023-09-01 |
| 发明（设计）人： | 宋国旭;田勇;张飞;田春红;高星;朱晓晓;范东东 | 申请（专利权）人： | 中国科学院生物物理研究所 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/63;C12N15/85;C07K14/005 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 闫书宁 |
| 地址： | 100101 北京市朝阳*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 新型 crispr cas9 抑制 蛋白 及其 改造 应用于 化学 可控 基因 编辑 方法 | ||
1. AcrIIA蛋白在细胞或真核生物中抑制Cas9基因编辑、调控和/或成像中的应用；
所述AcrIIA蛋白为AcrIIA32.1蛋白；
所述AcrIIA32.1蛋白为如下l1）或l2）：
l1）氨基酸序列是SEQ ID NO:12所示的蛋白质；
l2）在SEQ ID NO:12所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；
所述Cas9蛋白为SpyCas9蛋白或/和St3Cas9蛋白。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述细胞为细菌细胞。
3.权利要求1中所述AcrIIA蛋白在抑制Cas9蛋白活性中的应用；所述Cas9蛋白为SpyCas9蛋白或/和St3Cas9蛋白。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述抑制Cas9蛋白活性表现为抑制SpyCas9蛋白与DNA结合和/或抑制St3Cas9蛋白对底物DNA的切割活性。
5.一种化学诱导型iAcr的产品，其特征在于：所述产品包括权利要求1中所述AcrIIA32.1、配体依赖性内含肽和4-羟基三苯氧胺；其中，所述AcrIIA32.1作为化学诱导型anti-CRISPR 的蛋白；所述iAcr为inducible anti-CRISPR。
6.权利要求5所述产品在实现化学可控的基因编辑中的应用；所述化学可控为由4-羟基三苯氧胺调控。
7.一种化学可控的基因编辑的方法，其特征在于：所述方法采用权利要求5所述化学诱导型iAcr的产品进行基因编辑；所述方法依赖4-羟基三苯氧胺调节。
8.权利要求1中所述AcrIIA蛋白在制备化学诱导型iAcr的系统中的应用；所述iAcr为inducible anti-CRISPR；所述化学诱导为4-羟基三苯氧胺诱导。
9.权利要求1中所述AcrIIA蛋白在进行化学可控的基因编辑中的应用；所述化学可控为由4-羟基三苯氧胺调控。
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