[发明专利]一种深古菌转甲基酶Ι的基因、蛋白序列及其制备方法在审
| 申请号： | 202210110146.6 | 申请日： | 2022-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN116555209A | 公开（公告）日： | 2023-08-08 |
| 发明（设计）人： | 王风平;余甜甜;曾宪烘 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海恒慧知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 31317 | 代理人： | 张宁展 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 深古菌转 甲基 基因 蛋白 序列 及其 制备 方法 | ||
1.一种深古菌转甲基酶Ι的蛋白序列，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.编码权利要求1所述深古菌转甲基酶Ι蛋白序列的基因片段，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
3.一种重组表达载体，其特征在于，包含权利要求2所述的基因片段。
4.一种重组菌，其特征在于，包含权利要求3所述的重组表达载体。
5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌为大肠杆菌。
6.一种深古菌转甲基酶Ι的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.构建如权利要求3所述的重组表达载体；
S2.将步骤S1得到的重组表达载体转入宿主细胞，并对宿主细胞进行扩大培养、诱导表达；
S3.收集诱导培养后的宿主细胞，进行破碎、加热、离心，得到上清液；
S4.对上清液进行纯化，得到所述转甲基酶Ι。
7.一种如权利要求6所述的制备方法制得的深古菌转甲基酶Ι。
一种如权利要求7所述深古菌转甲基酶Ι的转甲基反应缓冲液，其特征在于，所述缓冲液反应体系中含35mmol/L Tris-HCl，70mmol/L KCl，12mmol/L MgCl2，0.5mmol/L Ti(III)citrate，2.3mmol/L ATP，0.08mg/mL激活酶，1.2mg/mL Co(II)-咕啉环蛋白，2.3mmol/L愈创木酚和0.015mg/mL Trigger Factor标签与深古菌甲基转移酶I。
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