[发明专利]一种产高活性纤维素酶的复合菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种产高活性纤维素酶的复合菌剂，其特征在于，包括以下体积份数的菌剂：地衣芽孢杆菌25～40份、胶冻样类芽孢杆菌25～40份、枯草芽孢杆菌15～25份、酿酒酵母15～25份；所述各菌剂中菌的浓度为1.0×10⁹～1.5×10⁹个/ml。

2.权利要求1所述复合菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将地衣芽孢杆菌、胶冻样类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母分别活化培养，得到原种；

(2)将步骤(1)得到的原种进行发酵扩大培养，得到发酵菌液；

(3)将步骤(2)得到的发酵菌液分别接种于纤维素酶富集培养基中培养；

(4)将步骤(3)得到的菌液混合得到产高活性纤维素酶的复合菌剂。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中活化培养的温度为28～32℃，活化培养的时间为24～48h，活化培养时的震荡频率为160～170rpm。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中发酵扩大培养时原种的接种体积比例为1～5％，所述发酵扩大培养的培养基为LB培养基。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中发酵扩大培养的温度为28～32℃，发酵扩大培养时搅拌的转速为100～150r/min，溶解氧为2～3mg/L，当发酵菌液中微生物总菌数达到1.0×10⁹～1.5×10⁹个/ml时停止发酵。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中纤维素酶富集培养基以水为溶剂，包括以下浓度的组分：牛肉膏1～3g/L、蛋白胨4～6g/L、纤维素粉22～28g/L、硫酸铵1～2g/L、磷酸二氢钾0.5～1.5g/L、氯化钠0.2～1g/L、七水硫酸镁0.2～1g/L，所述纤维素酶富集培养基的pH值7.1～7.3。

7.根据权利要求2或6所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中培养的温度为28～32℃，培养的时间为24～72h，培养时震荡频率为160～170rpm。

8.权利要求1所述的复合菌剂在降解农村粪污污水中纤维素的应用，其特征在于，所述复合菌剂的使用量为污水质量的0.1～0.5％。