[发明专利]用于肝硬化预后评估的标志物组合

权利要求书

1.用于肝硬化预后评估的标志物组合，包括：(±)-3,5,5-三甲基-1-己醇、二氯甲烷、吡啶、γ-丁内酯、香茅醛、乳酸乙酯、愈创木酚、亚油酸甲酯、氧戊二酸、(±)-赤-异亮氨酸、3-苯丙醛和N-乙酰芳胺，优选地，所述N-乙酰芳胺为N-乙酰苯胺。

2.一种确定肝硬化预后评估的标志物组合的方法，所述标志物组合包括(±)-3,5,5-三甲基-1-己醇、二氯甲烷、吡啶、γ-丁内酯、香茅醛、乳酸乙酯、愈创木酚、亚油酸甲酯、氧戊二酸、(±)-赤-异亮氨酸、3-苯丙醛和N-乙酰芳胺，优选地，所述N-乙酰芳胺为N-乙酰苯胺，所述方法包括以下步骤：

步骤1.收集呼出气冷凝物(EBC)；

步骤2.使用二维气相色谱串联飞行时间质谱分析呼出气冷凝物，采集质谱数据；和

步骤3.用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析对质谱数据进行分析，得到用于肝硬化预后评估的标志物组合。

3.根据权利要求2所述的方法，其中气相色谱条件为：进样量10μl，氦气用作载气，前入口吹扫流量为3ml·min^-1，通过色谱柱的气体流速为1ml·min^-1，初始温度保持在50℃持续1分钟，然后以4℃/分钟的速度升至150℃，接着以8℃/分钟的速度升至210℃，并在210℃保持5.5分钟。

4.根据权利要求3所述的方法，其中质谱条件为：注射、转移管线和离子源温度分别为240℃、280℃和220℃；电子碰撞模式下能量为70eV；在溶剂延迟0.3分钟后，以每秒50±5个光谱的速率，在m/z范围为33-500的全扫描模式下采集质谱数据。

5.根据权利要求4所述的方法，还包括收集呼出气冷凝物后进行样品提取，包括：培养时间和温度分别设定为15分钟和50℃，搅拌器速度固定在500转/分持续5-10分钟、然后在100转/分持续5-10分钟后用于样品提取，解吸时间为10分钟；优选地，培养时间和温度分别设定为15分钟和50℃，搅拌器速度固定在500转/分持续10分钟、然后在100转/分持续10分钟后用于样品提取。

6.权利要求1所述的肝硬化预后评估的标志物组合用于制备肝硬化预后评估试剂盒的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其中用于肝硬化预后评估的样品为呼出气冷凝物。