[发明专利]一种耐盐碱草酸青霉菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种耐盐碱草酸青霉菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：对保藏编号为CGMCC No.12628的草酸青霉菌进行驯化；

S2：在高盐碱条件下对驯化后的草酸青霉菌进行发酵；

优选地，高盐碱条件包括：盐浓度为10％以上和pH值为11以上。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，驯化包括耐盐碱驯化；耐盐碱驯化包括：采用不同盐浓度梯度和碱浓度梯度的培养基对草酸青霉菌进行驯化培养；

优选地，盐浓度梯度为0％、2％、5％、7％、10％的NaCl；碱浓度梯度为pH6、pH8、pH9、pH10、pH11。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，驯化还包括耐盐碱定向驯化；耐盐碱定向驯化包括采用添加高盐碱物料浸出液的培养基对草酸青霉菌进行驯化培养，高盐碱物料包括味精渣、碱解海藻渣和厨余垃圾堆肥发酵物料中的至少一种；

优选地，高盐碱物料包括物料A和物料B，其中物料A为味精渣，物料B为碱解海藻渣或厨余垃圾堆肥发酵物料；

优选地，高盐碱物料中物料A与物料B的质量比为(1.5-2.5)：1。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，高盐碱物料浸出液的制备方法包括：将高盐碱物料与水混合后搅拌、静置、取上清液，得到高盐碱物料浸出液；

优选地，高盐碱物料与水质量体积比为1g：(1.5-2.5)mL；

优选地，培养基中高盐碱物料浸出液的浓度为15-25％。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，发酵为固态发酵；固态发酵原料包括味精渣、碱解海藻渣和厨余垃圾堆肥发酵物料中的至少一种；

优选地，固态发酵原料包括物料A和物料B，其中物料A为味精渣，物料B为碱解海藻渣或厨余垃圾堆肥发酵物料；

优选地，固态发酵原料中物料A与物料B的质量比为(1.5-2.5)：1。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，固态发酵包括：

将培养好的种子液培养物加入固态发酵原料中，接种量不低于1×10⁴cfu/g物料，于28-30℃下恒温培养7-10天，得到耐盐碱草酸青霉菌剂。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，种子液培养物的制备方法包括：

将驯化后的草酸青霉菌的活化孢子粉、分散剂和无菌水混合，制得孢子菌悬液；

将孢子菌悬液接种于灭菌的液体种子培养基中，于28-30℃下恒温震荡培养60-68h，得到种子液培养物；

优选地，分散剂为甘油或吐温80；

优选地，孢子菌悬液中孢子浓度不低于3×10⁷cfu/mL。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括步骤S3：对发酵产物进行粉碎、干燥、过筛，得到耐盐碱草酸青霉菌剂；

优选地，耐盐碱草酸青霉菌剂的有效活菌数不低于2×10⁹cfu/g；

优选地，耐盐碱草酸青霉菌剂的水分含量不高于15％。

9.一种耐盐碱草酸青霉菌剂，其特征在于，按照权利要求1-8任一所述的制备方法制得。

10.权利要求9所述的耐盐碱草酸青霉菌剂在作物种植或盐碱土壤改良中的应用。