[发明专利]基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型及其构建方法与应用

权利要求书

1.基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)细菌菌液准备；

(2)解剖小鼠；

(3)无菌环境取小鼠肠组织；

(4)去除肠组织外部的膜、血管、脂肪；

(5)清洗肠组织；

(6)肠组织分段；

(7)接种细菌菌液；

(8)肠组织与菌液于恒温摇床培养箱中共培养。

2.根据权利要求1所述基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型的构建方法，其特征在于，步骤(1)所述细菌菌液为培养10-15h的新鲜种子液，离心，去除上清液，使用缓冲液重悬得菌液浓度为10⁷-10⁹CFU/mL。

3.根据权利要求1所述基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型的构建方法，其特征在于，步骤(5)所述清洗肠组织是使用缓冲液冲洗肠内容物。

4.根据权利要求1所述基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型的构建方法，其特征在于，步骤(6)所述肠组织分段包括将小鼠整段肠组织按组织特征将十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠分段，幽门后4±0.5cm为十二指肠，十二指肠与回肠中间为空肠，盲肠前4±0.5cm为回肠，盲肠后6±1cm为结肠，使用无菌剪刀将各肠段分为长度相等的肠组织块。

5.根据权利要求1所述基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型的构建方法，其特征在于，步骤(7)所述接种细菌菌液包括将肠组织块平铺于孔板中，使肠道黏膜层朝上侧，每孔接种细菌菌液量为1-2mL。

6.根据权利要求1所述基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型的构建方法，其特征在于，步骤(8)所述共培养是指肠组织与菌液于恒温摇床培养箱中培养，培养温度为35-38℃，摇床转速为100-200rpm。

7.根据权利要求1所述基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型的构建方法，其特征在于，步骤(8)所述共培养的时间设计为30min-2h。

8.权利要求1-7任一项所述的构建方法建立的基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型。

9.根据权利要求8所述基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型，其特征在于，所述模型为细菌在肠组织上成功黏附，细菌在肠组织上成功黏附主要是通过计算细菌在肠组织黏附的菌落总数、扫描电子显微镜观察细菌在肠组织上成功黏附、检测细菌黏附肠组织后整体多糖含量增加、蛋白质含量增加、生物被膜生物量的增加。

10.权利要求8所述基于小鼠肠组织高通量细菌黏附模型用于细菌黏附能力评估以及细菌黏附的益生菌饮品、益生菌粉、保健品及药物的活性评价。