[发明专利]一种基于适配体检测C-反应蛋白的方法在审

专利信息
申请号: 202210085686.3 申请日: 2022-01-25
公开(公告)号: CN114487438A 公开(公告)日: 2022-05-13
发明(设计)人: 刘利红;唐庆 申请(专利权)人: 南方医科大学
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N27/447;C12Q1/6844;C12N15/115
代理公司: 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 代理人: 林德强
地址: 510515 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 体检 反应 蛋白 方法
【权利要求书】:

1.一种检测C-反应蛋白的方法,包含以下步骤:

S1:将适配体与待测样本混合得混合物A;

S2:向混合物A中加入切刻内切酶和适配体的互补DNA进行酶切反应,然后离心得上清;

S3:取上清进行毛细管电泳检测。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述互补DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1所述的混合的条件为13~17℃、27~33min。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S2所述的酶切反应条件为35~39℃、55~65min。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述内切酶的酶活力为5~15U。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述电泳条件为电压12~18kV;进样时间3~5min;UV检测波长:250~300nm。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述电泳的缓冲液组成为:40~50mM硼砂和60~80mM Tris。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述缓冲液的pH为8~10。

10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述检测时的进样为重力进样,其进样高度优选为15~16cm。

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