[发明专利]一种基于适配体检测C-反应蛋白的方法在审
申请号: | 202210085686.3 | 申请日: | 2022-01-25 |
公开(公告)号: | CN114487438A | 公开(公告)日: | 2022-05-13 |
发明(设计)人: | 刘利红;唐庆 | 申请(专利权)人: | 南方医科大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N27/447;C12Q1/6844;C12N15/115 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 林德强 |
地址: | 510515 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 体检 反应 蛋白 方法 | ||
1.一种检测C-反应蛋白的方法,包含以下步骤:
S1:将适配体与待测样本混合得混合物A;
S2:向混合物A中加入切刻内切酶和适配体的互补DNA进行酶切反应,然后离心得上清;
S3:取上清进行毛细管电泳检测。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述互补DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1所述的混合的条件为13~17℃、27~33min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S2所述的酶切反应条件为35~39℃、55~65min。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述内切酶的酶活力为5~15U。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述电泳条件为电压12~18kV;进样时间3~5min;UV检测波长:250~300nm。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述电泳的缓冲液组成为:40~50mM硼砂和60~80mM Tris。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述缓冲液的pH为8~10。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述检测时的进样为重力进样,其进样高度优选为15~16cm。
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