[发明专利]一种鉴定野豌豆属品种真实性的方法及其专用SSR引物组合

权利要求书

1.鉴定待测野豌豆为或候选为9种野豌豆属国审品种中的哪一种的引物组合，为引物组合2或引物组合1；

引物组合2由引物对VA42、引物对VA100、引物对VA107、引物对VA114和引物对VA118组成；

引物对VA42由SEQ ID NO:1所示的单链DNA分子和SEQ ID NO:2所示的单链DNA分子组成；引物对VA100由SEQ ID NO:3所示的单链DNA分子和SEQ ID NO:4所示的单链DNA分子组成；引物对VA107由SEQ ID NO:5所示的单链DNA分子和SEQ ID NO:6所示的单链DNA分子组成；引物对VA114由SEQ ID NO:7所示的单链DNA分子和SEQ ID NO:8所示的单链DNA分子组成；引物对VA118由SEQ ID NO:9所示的单链DNA分子和SEQ ID NO:10所示的单链DNA分子组成；

引物组合1由引物组VA42、引物组VA100、引物组VA107、引物组VA114和引物组VA118组成；引物组VA42由所述引物对VA42和荧光标记甲修饰的引物M13组成；引物组VA100由所述引物对VA100和荧光标记乙修饰的引物M13组成；引物组VA107由所述引物对VA107和荧光标记丙修饰的引物M13组成；引物组VA114由所述引物对VA114和荧光标记丁修饰的引物M13组成；引物组VA118由所述引物对VA118和荧光标记戊修饰的引物M13组成；

所述引物M13的核苷酸序列如SEQ ID NO:1自5’末端起第1-19位所示；

荧光标记甲、荧光标记乙、荧光标记丙、荧光标记丁和荧光标记戊可以发出相同的荧光，也可以发出不同的荧光；

所述9种野豌豆属国审品种为江淮、凉山、公农、兰箭2号、川北、兰箭3号、清水河、延边和333/A。

2.用于鉴定待测野豌豆为或候选为9种野豌豆属国审品种中的哪一种的方法，包括如下步骤：以待测野豌豆的基因组DNA为模板，分别采用权利要求1中引物对VA42、引物对VA100、引物对VA107、引物对VA114和引物对VA118进行PCR扩增，然后依次按照(标准a1)、(标准a2)、(标准a3)、(标准a4)和/或(标准a5)进行判断：

(标准a1)采用引物对VA42进行PCR扩增：

如果仅得到182bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为凉山；

如果仅得到208bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为兰箭2号、兰箭3号、清水河或333/A；

如果得到112bp和134bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为川北；

如果得到210bp和214bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为延边；

(标准a2)采用引物对VA100进行PCR扩增：

如果仅得到232的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为江淮；

如果仅得到248的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为凉山；

如果仅得到238的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为兰箭2号、川北、兰箭3号、清水河或333/A；

(标准a3)采用引物对VA107进行PCR扩增：

如果仅得到448bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为江淮、兰箭2号、川北、兰箭3号、清水河或333/A；

如果仅得到252bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为公农；

如果仅得到250bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为延边；

(标准a4)采用引物对VA114进行PCR扩增：

如果仅得到144bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为江淮或333/A；

如果仅得到240bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为为公农或延边；

如果得到144bp和152bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为兰箭2号、川北、兰箭3号或清水河；

(标准a5)采用引物对VA118进行PCR扩增：

如果得到218bp和238bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为江淮或清水河；

如果得到218bp和258bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为兰箭2号；

如果得到218bp和248bp的扩增产物，则待测野豌豆为或候选为川北、兰箭3号或333/A；

所述9种野豌豆属国审品种为江淮、凉山、公农、兰箭2号、川北、兰箭3号、清水河、延边和333/A。