[发明专利]一种可视化检测儿童流感病毒的CRISPR系统及其方法和应用

权利要求书

1.一种可视化检测儿童流感病毒的CRISPR系统，其特征在于，包括：

病毒收集系统，所述病毒收集系统用于收集儿童流感病毒；

核酸扩增系统，所述核酸扩增系统包括依次连接的病毒裂解元件和恒温重组酶多聚酶扩增元件；所述病毒裂解元件与所述病毒收集系统连通，所述病毒裂解元件用于接收所述病毒收集系统收集到的所述儿童流感病毒并完成裂解；所述恒温重组酶多聚酶扩增元件用于接收裂解后的儿童流感病毒并进行核酸扩增；

检测系统，所述检测系统包括依次连接的CRISPR反应元件和侧向层析试纸条；所述CRISPR反应元件与所述恒温重组酶多聚酶扩增元件连接，所述CRISPR反应元件用于识别和切割核酸扩增产物；所述侧向层析试纸条用于对识别和切割后的产物进行可视化检测。

2.根据权利要求1所述的CRISPR系统，其特征在于，所述病毒收集系统包括依次连接的流通池和病毒收集元件；所述病毒收集元件与所述病毒裂解元件连通；所述流通池用于浸润所述病毒收集元件，并将所述病毒收集元件上收集的所述儿童流感病毒注入所述病毒裂解元件。

3.根据权利要求2所述的CRISPR系统，其特征在于，还包括第一聚乙烯醇薄膜、第二聚乙烯醇薄膜和第三聚乙烯醇薄膜，其中：

所述病毒裂解元件与所述恒温重组酶多聚酶扩增元件通过第一聚乙烯醇薄膜相隔；

所述恒温重组酶多聚酶扩增元件与所述CRISPR反应元件通过第二聚乙烯醇薄膜相隔；

所述CRISPR反应元件与所述侧向层析试纸条通过第三聚乙烯醇薄膜相隔。

4.根据权利要求1所述的CRISPR系统，其特征在于，所述CRISPR反应元件中装有固相反应体系，所述固相反应体系包括Cas蛋白，引导RNA和单链DNA荧光探针；

优选地，所述Cas蛋白包括Cas12或Cas13蛋白中的至少一种；所述引导RNA包括启动子、支架序列和靶点序列；所述Cas蛋白和所述引导RNA组合形成稳定的复合物。

5.根据权利要求1所述的CRISPR系统，其特征在于，所述侧向层析试纸条上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区和吸附区，所述检测区设有C线和T线。

6.根据权利要求5所述的CRISPR系统，其特征在于，所述C线上喷涂有链霉亲和素。

7.根据权利要求5所述的CRISPR系统，其特征在于，所述T线上喷涂有抗荧光素的抗体；优选地，所述T线设有4条，分别喷涂有抗TEX、抗Cy5、抗FAM、抗FITC的抗体。

8.根据权利要求5所述的CRISPR系统，其特征在于，所述结合区上固定有胶体金标记的抗荧光素的抗体。

9.权利要求1～8任一项所述CRISPR系统的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：启动病毒收集系统，收集儿童流感病毒，将所述儿童流感病毒送入病毒裂解元件完成裂解；

S2：裂解后的儿童流感病毒进入恒温重组酶多聚酶扩增元件进行核酸扩增；

S3：核酸扩增产物进入CRISPR反应元件后被识别和切割，识别、切割后的产物流入侧向层析试纸条，通过免疫反应进行显色，完成对所述儿童流感病毒的可视化检测。

10.权利要求1～8任一项所述的CRISPR系统在非诊断目的的儿童流感病毒检测中的应用。