[发明专利]一种测定干血片中多种雌激素的试剂盒及方法

权利要求书

1.一种测定干血片中多种雌激素的方法，其特征在于：使用试剂盒，包括如下步骤：

用第一萃取剂将雌激素从干血片中萃取出的步骤，得第一萃取样品；

用衍生化试剂将所述第一萃取样品衍生化处理的步骤，得衍生化样品；

用第二萃取剂将雌激素从衍生化样品中萃取出的步骤，得第二萃取样品；

将第二萃取样品离心后取上清液，用高效液相色谱串联质谱检测的步骤；

所述试剂盒包括以下组分：校准品、质控品、内标 标准品、衍生化试剂、缓冲液、第一萃取剂、第二萃取剂；

所述第一萃取剂为甲醇和乙腈的混合溶液，所述甲醇和乙腈的体积比为50:50；所述第二萃取剂为甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、二氯甲烷中的一种或几种；

所述衍生化试剂为丹磺酰氯；

所述校准品为雌酮、雌二醇、雌三醇；所述内标标准品为雌酮-d4、雌二醇-d3、雌三醇-d3；

所述高效液相色谱条件为：进样器温度：4 ℃；柱温：40 ℃；运行时间：3.5 min；

所述流动相A：0.1%甲酸水溶液；

所述流动相B：含0.1%甲酸的甲醇溶液。

2.根据权利要求1所述的一种测定干血片中多种雌激素的方法，其特征在于：所述缓冲液为碳酸钠、磷酸钠或硼酸钠缓冲液。

3.根据权利要求1或2任一项所述的一种测定干血片中多种雌激素的方法，其特征在于：试剂盒还包括甲醇、乙腈、甲酸、牛血清白蛋白。

4.根据权利要求1所述的一种测定干血片中多种雌激素的方法，其特征在于：所述质谱条件为：

毛细管电压：3.0 kV；脱溶剂温度：650 ℃；脱溶剂气：800 L/hr；锥孔气：150 L/hr；扫描模式：多反应离子检测，正离子模式。