[发明专利]维生素D的痕量检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种维生素D的痕量检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

配制25(OH)D₂、25(OH)D₃、3-epi-25(OH)D₃、25(OH)D₂-d₆、25(OH)D₃-d₆标准溶液；

取血清样品，加入含有内标的沉淀剂混合液、混匀，预处理后，加入复溶液复溶，进行HPLC－MS/MS分析，以内标法测定血清样品中25(OH)D₂、25(OH)D₃以及3-epi-25(OH)D₃的含量。

2.如权利要求1所述的维生素D的痕量检测方法，其特征在于，所述预处理步骤包括：

加入萃取液，混匀、离心，取上层溶液于室温下氮气吹干。

3.如权利要求1所述的维生素D的痕量检测方法，其特征在于，所述25(OH)D₂、25(OH)D₃、3-epi-25(OH)D₃稀释后的浓度为1ng/mL-200ng/mL，所述25(OH)D₂-d₆、25(OH)D₃-d₆稀释后的浓度分别为120ng/mL、300ng/mL。

4.如权利要求1所述的维生素D的痕量检测方法，其特征在于，色谱柱为Kinetex F5色谱柱。

5.如权利要求1所述的维生素D的痕量检测方法，其特征在于，流动相A：0.1％甲酸水溶液；流动相B：0.1％甲酸甲醇溶液。

6.如权利要求1所述的维生素D的痕量检测方法，其特征在于，色谱柱的柱温:40～45℃；流速:0.3～0.5mL/min。

7.如权利要求1所述的维生素D的痕量检测方法，其特征在于，梯度洗脱:0-0.5min，50％B；0.5-6.0min，95％B；6.0-7.0min，95％B；7.0-7.1min，50％B；7.1-8.5min，50％B。

8.如权利要求1所述的维生素D的痕量检测方法，其特征在于，利用电喷雾离子源、多反应监测模式检测。

9.如权利要求8所述的维生素D的痕量检测方法，其特征在于，气帘气15psi，喷雾器60psi，辅助加热气65psi，温度350℃，离子化电压5500V，碰撞气3psi。

10.一种用于如权利要求1-9任一项所述的维生素D的痕量检测方法的试剂盒，其特征在于，包括以下溶液：校准品、内标混合液、提取液、洗脱剂、复溶液、流动相以及洗针液。