[发明专利]Bsu聚合酶介导的荧光编码传感器及其在8-oxo-7,8-二氢鸟嘌呤检测中的应用在审
| 申请号: | 202210044450.5 | 申请日: | 2022-01-14 |
| 公开(公告)号: | CN114507713A | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
| 发明(设计)人: | 张春阳;王子月;李玥颖 | 申请(专利权)人: | 山东师范大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6825 | 分类号: | C12Q1/6825;C12Q1/6876 |
| 代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 宋海海 |
| 地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | bsu 聚合 酶介导 荧光 编码 传感器 及其 oxo 二氢鸟 嘌呤 检测 中的 应用 | ||
1.一种Bsu聚合酶介导的荧光编码传感器,所述荧光编码传感器至少包括DNA捕获探针,Bsu聚合酶和荧光基团修饰的dATP;
其中,所述DNA捕获探针具有与待测序列杂交的互补区域,从而可以与待测序列杂交形成部分双链结构。
2.如权利要求1所述的荧光编码传感器,其特征在于,所述DNA捕获探针5'末端修饰有生物素。
3.如权利要求1所述的荧光编码传感器,其特征在于,所述荧光基团修饰的dATP中,所述荧光基团为Cy5。
4.如权利要求1所述的荧光编码传感器,其特征在于,所述荧光编码传感器还包括链霉亲和素包被的磁珠和核酸外切酶III。
5.如权利要求1所述的荧光编码传感器,其特征在于,所述荧光编码传感器还包含缓冲液。
6.权利要求1-5任一项所述荧光编码传感器在检测8-oxo-7,8-二氢鸟嘌呤中的应用。
7.一种检测8-oxo-7,8-二氢鸟嘌呤的方法,其特征在于,所述方法包括采用权利要求1-5任一项所述荧光编码传感器进行检测。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法包括:
S1、将待测样品与DNA捕获探针进行孵育,得杂交产物;
S2、将杂交产物加入含有Bsu聚合酶和荧光基团修饰的dATP的溶液中继续反应得荧光基团标记的生物素化双链DNA;
S3、使用链霉亲和素包被的磁珠富集步骤S2中获得的荧光基团标记的生物素化双链DNA,得MB-捕获探针-荧光基团复合物,向其中加入核酸外切酶III,孵育并磁分离;
优选的,所述方法还包括对步骤S3获得的反应产物进行检测分析;
进一步优选的,所述检测分析包括荧光检测分析、单分子检测分析和凝胶电泳分析。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述待测样品为生物样品,包括离体的血液、体液、组织、细胞和亚细胞。
10.权利要求1-5任一项所述荧光编码传感器和/或检测方法在8-oxo-7,8-二氢鸟嘌呤相关药物筛选和/或生物样品8-oxo-7,8-二氢鸟嘌呤检测分析中的应用。
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