[发明专利]一种免疫佐剂及其在乙肝治疗性疫苗中的应用

权利要求书

1.一种乙肝治疗性疫苗佐剂，其特征在于，该佐剂包括氢氧化铝(Alum)和酿酒酵母细胞裂解物(Yeast)。

2.如权利要求1所述的乙肝治疗性疫苗佐剂，其特征在于，所述氢氧化铝(Alum)和酿酒酵母细胞裂解物(Yeast)在每个剂量中的比例为：(0～300ug Alum):(1×10⁷～1×10¹⁰个酿酒酵母细胞来源的细胞裂解物)。

3.如权利要求1所述的乙肝治疗性疫苗佐剂，其特征在于，所述氢氧化铝(Alum)和酿酒酵母细胞裂解物(Yeast)在每个剂量中的最优比例为：(100ug Alum)：(5×10⁸个酿酒酵母细胞来源的细胞裂解物)。

4.将权利要求1-3中所述的乙肝治疗性疫苗佐剂在制备能够增强乙肝特异性细胞及体液免疫应答的乙肝治疗性疫苗中的应用。

5.如权利要求1-3所述的乙肝治疗性疫苗佐剂的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)取酿酒酵母细胞放入离心管中，并将该细胞在低温与常温的环境下反复冻融，再用PBS洗涤并离心，弃去上清，制得酵母细胞沉淀；

(2)向步骤(1)制得的酵母细胞沉淀中加入PBS，超声破碎并离心，收集离心上清，并除菌过滤，滤过液即为酿酒酵母细胞裂解物；

(3)将步骤(2)制得的酿酒酵母细胞裂解物与氢氧化铝按照比例混合均匀，即制备出新型的免疫佐剂。

6.如权利要求5所述的乙肝治疗性疫苗佐剂的制备方法，其特征在于，

其中，步骤(1)中所述的低温为零下60℃-零下86℃；

其中，步骤(1)中所述的常温为34℃-38℃；

其中，步骤(1)中所述的多次冻融的次数为3-6次；

其中，步骤(1)中所述的PBS洗涤，次数为1-3次；

其中，步骤(1)中所述的离心方式为2000-5000rpm离心5-20分钟；

其中，步骤(3)中的酿酒酵母细胞裂解物与氢氧化铝在每个剂量中的混合比例为：

(1×10⁷～1×10¹⁰个酿酒酵母细胞来源的细胞裂解物)：(0～300ug Alum)

其中，步骤(2)中所述的超声破碎时间为1-10分钟。

7.如权利要求5所述的乙肝治疗性疫苗佐剂的制备方法，其特征在于，

其中，步骤(1)中所述的低温为零下80℃；

其中，步骤(1)中所述的常温为37℃；

其中，步骤(1)中所述的多次冻融的次数为5次；

其中，步骤(1)中所述的PBS洗涤，次数为2次；

其中，步骤(1)中所述的离心方式为3000rpm离心10分钟；

其中，步骤(2)中所述的超声破碎时间为5分钟；

其中，步骤(3)中的酿酒酵母细胞裂解物与氢氧化铝在每个剂量中的混合比例为：

(5×10⁸个酿酒酵母细胞来源的细胞裂解物)：(100ug Alum)。