[发明专利]犬冠状病毒二联荧光定量检测试剂在审
申请号: | 202210036111.2 | 申请日: | 2022-01-13 |
公开(公告)号: | CN114354561A | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
发明(设计)人: | 刘忠;刘青平;刘春丽;王金龙;唐妍 | 申请(专利权)人: | 山东鑫诺生物工程有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/569;G01N33/533;G01N33/543 |
代理公司: | 山东菩勤专利代理有限公司 37343 | 代理人: | 邱克强 |
地址: | 277800 山东省枣庄市高新*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 冠状病毒 二联 荧光 定量 检测 试剂 | ||
1.犬冠状病毒二联荧光定量检测试剂,其特征在于:包括CPV/CCV二联检测试剂卡和样本稀释液;
所述CPV/CCV二联检测试剂卡包括试剂卡本体和试剂卡本体上依次设置的加样孔、结合垫、NC膜,所述结合垫中含有荧光标记的荧光微球,所述结合垫与NC膜的一端相连接,所述NC膜中部设置有T线,所述NC膜的另一端设置有C线,所述加样孔用于添加所述样本稀释液;
所述荧光微球包括偶联犬冠状病毒抗体的微球和偶联犬细小病毒抗体的微球;
所述样本稀释液由以下原料组成:牛血清白蛋白1~2%、叠氮化钠0.1~1%、聚多卡醇0.1~0.5%、柠檬酸三钠0.2~0.55%、柠檬酸0.15~0.18%、硫氰酸胍0.1-1%、余量为纯化水。
2.根据权利要求1所述的犬冠状病毒二联荧光定量检测试剂,其特征在于:还包括移液器吸头、棉签,所述移液器吸头用于将样本稀释液缓缓滴入于试剂卡本体的加样孔中,所述棉签用于样本的采样。
3.根据权利要求1所述的犬冠状病毒二联荧光定量检测试剂,其特征在于:所述样本稀释液由以下原料组成:0.3g/mL牛血清白蛋白1-2%、0.1g/mL叠氮化钠0.1-1%、0.2g/mL聚多卡醇0.1-0.5%、0.8g/mL柠檬酸三钠0.2-0.55%、0.6g/mL柠檬酸0.15~0.18%、0.01~0.1g/mL硫氰酸胍0.1-1%、余量为纯化水。
4.根据权利要求1所述的犬冠状病毒二联荧光定量检测试剂的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一、采用双抗体夹心法检测犬类粪便中的犬细小/犬冠状病毒浓度,将测试样本加入到稀释液中混匀,滴加到加样孔内,抗原会随着样本稀释液扩散到结合垫上,与荧光标记的抗体相结合,形成复合物;
步骤二、所述复合物会继续随着溶液扩散到NC膜的T线上,被固定在T线上的包被抗体所捕获,结合形成双抗体复合物,T线上捕获的抗原越多,T线的荧光信号就越强,没有被捕获的荧光微球复合物将继续沿着NC膜扩散到C线,被包被在C线上的抗体所捕获,形成C线;
步骤三、利用荧光检测仪,检测层析完成后的试剂条,根据荧光的强度可得出样本溶液中抗原的浓度。
5.根据权利要求1所述的犬冠状病毒二联荧光定量检测试剂的使用方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一、打开仪器开关,登录测试系统;
步骤二、从试剂盒中取出1个试剂卡、1瓶稀释液;
步骤三、室温下使用棉签在犬肛门内壁或从犬新鲜粪便处采样,将取样后的棉签在稀释液中充分搅拌,然后将棉签在瓶内挤压后丢弃;
步骤四、将铝箔袋撕开,取出试剂卡,用移液器从瓶中取80μL混匀液体,缓缓滴入于试剂卡的加样孔中;
步骤五、加样完成后将试剂卡插入到仪器卡槽内即可,仪器孵化10分钟后,自动检测;
步骤六、测量完成后仪器会自动显示测量浓度值和打印检测结果。
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