[发明专利]一种核桃肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种核桃肽及其制备方法和应用，属于生物活性肽技术领域。本发明所述核桃肽为分子量1189.186Da的单链多肽，核桃肽结构序列为GEEREERGLD。本发明通过对核桃粕浆复合酶解得到核桃蛋白，在核桃蛋白溶液中依次添加碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶进行酶解得到核桃蛋白浆酶解产物，再采用高效液相法分离纯化得到本发明所述核桃肽。本发明提供的核桃肽具有较高的抗氧化活性，对H₂O₂诱导的PC12细胞具有明显的保护作用，同时对中枢神经具有保护功效；本发明提供的核桃肽可以有效改善实验动物空间记忆力和学习探索能力。

技术领域

本发明涉及生物活性肽技术领域，具体涉及一种核桃肽及其制备方法和应用。

背景技术

核桃，又称胡桃，羌桃，为胡桃科植物。与扁桃、腰果、榛子并称为世界著名的“四大干果”。核桃仁含有丰富的营养素，每百克含脂肪较多，蛋白质15~20克，碳水化合物10克；并含有人体必需的钙、磷、铁等多种微量元素和矿物质，以及胡萝卜素、核黄素等多种维生素，深受人们喜爱。

核桃粕是核桃榨油时的副产物，目前仅被用作饲料或肥料，这使得核桃粕中的营养物质没有得到充分利用，特别是其中的生物活性物质被忽视。高营养价值的核桃粕的利用率不高导致产品增值较低。近几十年，生物活性肽的发展为核桃粕的精深加工带来了新思路。核桃粕蛋白酶解物具有较多的生物活性，多肽多样的生物活性功能和良好的加工特性使其逐渐成为研究的热点。

记忆力下降作为一种临床症状在很多神经退行性疾病中都有表现，目前研究较多的有阿尔兹海默病、血管性痴呆、帕金森症、铝中毒、癫痫等。记忆力下降作为神经退行性疾病发生发展过程中显著的特征而广受关注。神经退行性疾病的成因有很多，包括β-淀粉样肽（Aβ）的积淀、胆碱功能系统功能紊乱、谷氨酸含量过高、线粒体作用紊乱、氧化应激及炎症释放等。由此可见，对神经退行性疾病中记忆能力的调控趋势是多方位多靶点的。因此，开发具有预防、改善记忆力下降及认知功能退化的活性物质成为科学工作者的重点。

核桃蛋白是一种包含18种氨基酸且8种必需氨基酸种类齐全、含量合理的优质植物蛋白。其中谷氨酸（Glu）、精氨酸（Arg）和天冬氨酸（Asp）对于维持人体神经系统具有重要的作用。核桃肽中起神经保护、辅助改善记忆作用的多肽序列结构尚未有大量的研究。现有的核桃肽提取工艺存在成本高、浪费大，不利于工业化的问题，并且酶解过程常采用各种蛋白酶一起参与整个酶解过程，忽略了蛋白酶之间的差异性，从而存在酶解效果不理想，制备得到的核桃肽质量不高的问题。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种核桃肽，所得核桃肽对中枢神经具有保护功效，可以有效改善实验动物空间记忆力和学习探索能力。

本发明的目的还在于提供了上述核桃肽的制备方法和应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种核桃肽，所述核桃肽为单链多肽，结构序列为GEEREERGLD。

优选的，所述肽链分子量为1189.186Da。

本发明还提供了上述核桃肽的制备方法，包括以下步骤：

（1）核桃粕浆用纤维素酶和果胶酶进行酶解，灭酶后过滤干燥，得到核桃蛋白；

（2）制备核桃蛋白浆，将核桃蛋白浆在50~60℃保温，调节pH后依次用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶进行酶解，得到核桃蛋白酶解液；

（3）所述核桃蛋白酶解液中加入活性炭保温、过滤、干燥，得核桃肽混合物；

（4）将核桃肽混合物制备成溶液，采用高效液相色谱分离纯化得到核桃肽GEEREERGLD。