[发明专利]一种鉴别长吻鮠遗传性别的分子标记及应用

权利要求书

1.一种鉴别长吻鮠遗传性别的分子标记，其特征在于：所述分子标记为长吻鮠第7号染色体第1130404位碱基处一段长32bp的插入/缺失的核苷酸序列，为SEQ ID NO.1所示，雌性个体具有SEQ ID NO.1序列，雄性个体缺失SEQ ID NO.1序列。

2.用于检测权利要求1所述分子标记的特异性引物，其特征在于：前引物F1，核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示，后引物R1，核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示。

3.采用如权利要求1所述分子标记鉴别长吻鮠遗传性别的检测方法，其特征在于：

（1）提取待测基因组DNA；

（2）以待测基因组DNA为模板，采用权利要求2所述特异性引物进行PCR扩增，PCR反应体系为：无Mg⁺ 的10 x Buffer 1 μL，25 mM MgCl₂ 1μL，dNTP Mix 1.6μL，正向、反向引物各10 mM各1μL，模板 DNA 1μL, 5U/μL TaqDNA聚合酶0.2 μL，ddH₂O 13.2μL；所述dNTP Mix中每种dNTP的浓度为10 mM；

PCR反应程序为：94℃预变性5 min；94℃变性30 s, 50 ℃退火30 s, 72 ℃ 延伸45s，循环30次; 72 ℃延伸10 min；

（3）根据电泳图对长吻鮠的遗传性别进行判断，仅存在410bp特异性片段的个体为雌性长吻鮠，有410 bp 和378 bp两条片段的个体为雄性长吻鮠。

4.一种用于鉴别长吻鮠遗传性别的试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括如下引物，前引物为F1，核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示，后引物为R1，核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示。