[发明专利]检测地中海贫血基因罕见突变的试剂、方法和试剂盒

权利要求书

1.用于检测地中海贫血基因罕见突变的试剂，其特征在于，所述试剂包括(1)～(3)中的至少一种：

(1)针对α地中海贫血相关基因HBA1和HBA2全序列的第一对引物；

(2)针对β地中海贫血相关基因HBB第1、2外显子和部分内含子的第二对引物；

(3)针对β地中海贫血相关基因HBB第3外显子和部分内含子的第三对引物；

其中，所述第一对引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2；

所述第二对引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4；

所述第三对引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，还包括测序引物，其核苷酸序列为SEQ IDNO：7和SEQ ID NO：8。

3.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，还包括(4)检测内参基因actin的引物，其核苷酸序列为SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10。

4.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，(1)、(2)或(3)中的一对引物浓度均为0.125uM。

5.如权利要求3所述的试剂，其特征在于，所述内参基因的引物的使用浓度比为1:1。

6.一种检测地中海贫血罕见基因突变的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)抽提待测基因组DNA；

(2)将所述待测基因组DNA与权利要求1-5之一所述的试剂混合，进行PCR；

(3)利用权利要求2所述的测序引物对(2)中的扩增产物进行测序；

(4)将(3)中的测序结果与野生型HBA1、HBA2和HBB基因序列进行比较，检测待测基因组DNA是否有罕见基因突变。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，扩增体系内模板DNA浓度最低为0.025ng/uL。

8.一种检测地中海贫血罕见基因突变的试剂盒，所述试剂盒含有试剂，其特征在于，所述试剂包括(1)～(3)中的至少一种：

(1)针对α地中海贫血相关基因HBA1和HBA2全序列的第一对引物；

(2)针对β地中海贫血相关基因HBB第1、2外显子和部分内含子的第二对引物；

(3)针对β地中海贫血相关基因HBB第3外显子和部分内含子的第三对引物；

其中，所述第一对引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2；

所述第二对引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4；

所述第三对引物对的核苷酸序列为SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6。

9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，还包括测序引物，其核苷酸序列为SEQ IDNO：7和SEQ ID NO：8。

10.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，还包括(4)检测内参基因actin的引物，其核苷酸序列为SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10。