[发明专利]一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法

说明书

本发明提供了一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法，属于氮含量测定技术领域。本发明在测定铵态氮时，采用了氧化剂(次氯酸钠和氯代异氰尿酸钠)和显色剂(水杨酸)体系，将铵态氮在氧化剂的作用下氧化为单氯胺，形成的单氯胺与显色剂形成靛酚，通过测定660nm处的紫外吸光度进行测量；在进行硝酸态氮、亚硝酸态氮和总溶解态氮测量时采用新的第一Griess试剂(N‑(1‑萘基)乙二胺二盐酸盐)和第二Griess试剂体系(磺胺和氯化钒)，进行测量，检出限低、灵敏度高。上述显色反应速度稳定、均一，能够在96孔板上进行。

本申请是申请日为2019年08月23日、申请号为201910782806.3、发明名称为《一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法》的分案申请。

技术领域

本发明涉及氮含量检测技术领域，尤其涉及一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法。

背景技术

现有技术中测定土壤中的氮含量的方法主要依赖于普通的紫外-可见分光光度计，每次只能测定有限的几个样品。而且，受限于测定过程中反应的速度以及均一性，无法在96孔板(酶标仪)上实现。另外，单纯依赖普通的紫外-可见分光光度计法进行测量，检出限和准确度均有待提高。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法，本发明的测定方法采用的氧化剂和显色剂，实现了利用96孔板(酶标仪)来测定样品中各种形态氮，且该方法具有较好的检出限和准确度，实现了氮的高通量测定。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法，包括以下步骤：

将待测样品配制成待测样品溶液，将所述待测样品溶液与氧化剂和显色剂混合、显色，测定660nm处的吸光度，根据所述测定得到的待测样品溶液在660nm处的吸光度和预定的铵态氮浓度-吸光度标准曲线，获得待测样品中铵态氮含量；

所述氧化剂为次氯酸钠和氯代乙腈尿酸钠的水溶液，所述显色剂为水杨酸的氢氧化钠溶液；

所述氧化剂中次氯酸钠与氯代异氰尿酸钠的质量比为6.5～7.2：0.025～0.035；

将所述待测样品溶液与第一Griess试剂和第二Griess试剂混合、显色，测定540nm处的吸光度，根据所述测定的待测样品溶液在540nm处的吸光度与预定的亚硝酸态氮浓度-吸光度标准曲线，获得待测样品中亚硝酸态氮含量；

将所述待测样品溶液与硝酸盐还原酶、第一Griess试剂和第二Griess试剂混合、显色，测定540nm处的吸光度，根据所述测定得到的待测样品溶液在540nm处的吸光度和预定的硝酸氮浓度-吸光度标准曲线，获得样品表观硝酸态氮含量；

所述第一Griess试剂为N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐水溶液，所述第二Griess试剂为磺胺和氯化钒的盐酸水溶液；

所述第二Griess试剂中磺胺和氯化钒的质量比为4.5～5.5：0.10～0.20；

所述硝酸氮标准溶液的溶质为硝酸钾；

将所述待测样品溶液与过硫酸盐氧化剂和水混合，得到消解液；将所述消解液、硝酸盐还原酶、第一Griess试剂和第二Griess试剂混合、显色，测定540nm处的吸光度，根据所述测定的待测样品溶液在540nm处的吸光度与预定的总溶解态氮浓度-吸光度标准曲线，获得待测样品中总溶解态氮含量；

所述过硫酸盐氧化剂为过硫酸钾、高锰酸钾、氢氧化钠和硼酸的混合物；

所述总溶解态氮标准溶液的溶质为甘氨酸；