[发明专利]改进的粒酶B变体

权利要求书

1.粒酶B变体，其包含一个或多个选自以下1)至20)的氨基酸残基:

1)位置43处的T、E、N或V；2)位置44处的L或F；3)位置45处的Q、L或A；4)位置46处的I、E、F或Q；5)位置47处的V；6)位置48处的F或K；7)位置99处的L；8)位置106处的A；9)位置149处的M；10)位置151处的L；11)位置155处的P；12)位置172处的L；13)位置175处的Q、E或I；14)位置183处的P；15)位置184处的L；16)位置200处的R；17)位置217处的I；18)位置219处的F；19)位置222处的G或S；以及20)位置229处的V。

2.权利要求1的粒酶B变体，其中所述变体包含以下1)至12)的氨基酸残基组合的任意一种:

1)位置44处的L，位置48处的K，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

2)位置44处的L，位置48处的E，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

3)位置44处的F，位置48处的K，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

4)位置44处的F，位置48处的E，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

5)位置44处的L，位置46处的I，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

6)位置44处的L，位置46处的E，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

7)位置44处的L，位置46处的F，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

8)位置44处的L，位置46处的Q，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

9)位置44处的F，位置46处的I，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

10)位置44处的F，位置46处的E，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；

11)位置44处的F，位置46处的F，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R；以及

12)位置44处的F，位置46处的Q，位置155处的P，位置172处的L，位置175处的I，和位置200处的R。

3.权利要求1或2的粒酶B变体，其中蛋白酶活性增强超过人野生型粒酶B的活性。

4.权利要求1至3中任一项的粒酶B变体，其对人野生型粒酶B的抑制剂具有抗性。

5.权利要求4的粒酶B变体，其中抑制剂是PI-9或肝素。

6.分离的核酸，其编码权利要求1至5中任一项的粒酶B变体。

7.包含权利要求6的分离的核酸的载体。

8.用权利要求6的分离的核酸或权利要求7的载体转化或转导的细胞。

9.细胞，其表达权利要求1至5中任一项的粒酶B变体。

10.药物组合物，其包含权利要求6的分离的核酸、权利要求7的载体或权利要求8或9的细胞。

11.药物组合物，其包含权利要求1至5中任一项的粒酶B变体。

12.药物组合物，其用于与表达受体的细胞的施用组合，其中所述组合物包含粒酶B变体或表达粒酶B变体的细胞，

其中受体通过其与配体的结合激活表达受体的细胞，并且

其中粒酶B变体比人野生型粒酶B具有更高的蛋白酶活性，并且对人野生型粒酶B的抑制剂具有抗性。