[发明专利]效价测定

权利要求书

1.用于评估人间充质干细胞(MSC)效价的方法，包括：

用促炎性细胞因子或其他促炎性分子刺激MSC群；

鉴别所述MSC产生抗炎细胞因子；和

量化所述MSC产生的抗炎细胞因子的水平。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述促炎性细胞因子是TNF-α、IL-17a或其组合。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述促炎性细胞因子是TNF-α。

4.根据权利要求1所述的方法，其中刺激步骤进行1小时到24小时。

5.根据权利要求1所述的方法，其中以0.1pg/mL至1μg/mL的量，向所述MSC施用所述促炎性细胞因子。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述MSC来源于骨髓、脂肪组织、外周血、肺、心脏、羊水、内部器官、羊膜、脐带或胎盘或其他组织，或从诱导多能干细胞(IPSC)或其他来源分化而来。

7.根据权利要求1所述的方法，其中可以鉴别和量化的所述抗炎细胞因子选自由IL-1RA、IL-4、IL-7、IL-8、IL-10、IL-13、G-CSF及其组合组成的组。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括在用所述促炎性细胞因子刺激前，检查所述MSC上生物标记的表达的步骤。

9.根据权利要求8所述的方法，其中探寻的生物标记包括CD105⁺、CD90⁺、CD73⁺、CD45^-、CD34^-、CD19^-、CD11b^-、IL-17RA⁺、HLA-DR^-或其任何组合。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还可以包括在用所述促炎性细胞因子刺激前，将所述MSC接种到基质上的步骤。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述基质是具有或不具有添加的基质涂层的膜、塑料表面、玻璃表面或细胞培养孔板，例如96孔板。

12.根据权利要求10所述的方法，其中所述将所述MSC接种到基质上持续1小时到24小时。

13.根据权利要求1所述的方法，其中在用所述促炎性细胞因子刺激前，将所述MSC分成较小的MSC群。

14.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括在用所述促炎性细胞因子刺激后分离所述MSC的上清液的步骤。

15.根据权利要求14所述的方法，其中一旦从所述MSC中分离出所述上清液，就将其冷冻保存。

16.根据权利要求14所述的方法，其中用电化学发光免疫测定或其他测定来分析所述上清液，以确定所述MSC产生的抗炎细胞因子的水平。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括在用所述促炎性细胞因子刺激所述MSC后，对所述MSC进行活力分析。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述活力分析是ATP检测分析、四氮唑还原分析、刃天青还原分析、蛋白酶活力标记分析、钠钾比分析、细胞溶解或膜渗漏分析、线粒体活性或半胱氨酸天冬氨酸酶分析、功能分析、基因组和蛋白质组分析或其任何组合。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述活力分析包括使用流式细胞术。