[发明专利]颗粒、DNA和RNA

说明书

本发明提供了用于治疗或预防病毒感染的竞争性颗粒(如病毒样颗粒、RNA和DNA)以及使用此类颗粒治疗或预防受试者(如人或动物受试者)的病毒感染(或其症状)或降低其风险的方法。例如，本文的方法是一种减少动物，如家畜或野生动物(例如蝙蝠、骆驼科动物或鳞甲目(例如穿山甲))中病毒的人畜共患病群体或减少所述群体的建立的方法。

技术领域

本发明提供了用于治疗或预防病毒感染的颗粒(如病毒样颗粒(VLP))和非自身复制颗粒，以及使用此类颗粒治疗或预防受试者(如人或动物受试者)的病毒感染(或其症状)或降低其风险的方法。颗粒(例如VLP)在宿主细胞中与病毒竞争，从而减少病毒的复制或增殖。例如，本文的方法是一种减少动物，如家畜或野生动物(例如蝙蝠、骆驼科动物或鳞甲目(例如穿山甲))中病毒的人畜共患病群体或减少所述群体的建立的方法。

背景技术

研究得最好的套式病毒(Nidovirus)、冠状病毒(coronaviruses)和动脉炎病毒(arteriviruses)，采用独特的转录机制，其涉及不连续RNA转录，该过程类似于相似性辅助的拷贝选择RNA重组。在感染期间，多个亚基因组(sg)mRNA从sg负链RNA模板的镜像组转录。sg mRNA都具有短的5′共同前导序列(L)，源自基因组RNA的5′端。非连续“前导”(TRS-L)和“主体”(TRS-B)序列的连接可能发生在负链合成期间。对于所有套式病毒，基因组的5′-most三分之二被复制酶多聚蛋白基因占据。在下游，有多个较小的基因，其由至多8个sgmRNA的嵌套组表达。在动脉和冠状病毒的情况下，这些sg mRNA是嵌合的并且与基因组的3′-和5′-共末端：它们都具有5′共同前导序列，其源自基因组RNA的5′末端并融合至转录物的‘主体’(即携带编码信息的3′末端部分)。冠状病毒前导长度为55至92个核苷酸，而动脉炎病毒前导长度约为200个核苷酸。前导和mRNA体序列连接在短的保守序列基序内，即转录调节序列(TRS)，其位于每个转录单元之前。Snijder及其同事提供了有说服力的证据，在动脉炎病毒中，前导体融合发生在(-)链RNA的合成期间，可能是通过类似于类似性辅助的拷贝选择RNA重组的过程。模板转换显然是由新生sg(-)链上的抗-TRS和5′-most基因组TRS之间的碱基配对指导的。

严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒，SARS-CoV，是基因组大小约为29,700个核苷酸(nt)的单链阳性RNA病毒，并且具有编码至少14个可读框(ORF)的典型冠状病毒基因组组织。SARS-CoV基因组的前三分之二产生两个大的重叠ORF(ORF la和ORF lb)。其它12个ORF由病毒基因组的剩余三分之一生成。在通过膜融合和胞吞作用感染宿主细胞如人肺细胞后，SARS-CoV将其遗传内容物释放到细胞质中，并立即从ORF 1a和ORF 1b合成两种大的多聚蛋白pp1a和pp1ab，涉及一种称为程序性-1核糖体移码的过程。后续对多聚蛋白pp1a和pplab进行蛋白水解处理用于生成16种非结构蛋白，包括病毒基因组复制和病毒RNA合成所必需的蛋白。位于SARS-CoV基因组3′1/3的5′至3′方向的ORF编码四个主要基因，其编码结构蛋白S(ORF 2)、E(ORF 4)、M(ORF 5)和N(ORF 9)。剩余的ORF编码其它8种辅助蛋白。两个ORF，ORF3a和ORF3b，位于S和E基因之间，ORF 6、7a、7b、8a和8b在M和N基因之间，而N基因也含有内部ORF 9b蛋白以在细胞质和细胞核之间穿梭并诱导抗先天免疫反应。