[发明专利]用于表征低丰度宿主细胞蛋白的方法

权利要求书

1.一种鉴定样品中的宿主细胞蛋白(HCP)杂质的方法，所述方法包括：

使所述样品与固相载体接触，

其中所述样品包含至少一种高丰度肽或蛋白，

其中相互作用肽配体已与所述固相载体连接，并且

其中所述HCP杂质能够与所述相互作用肽配体结合；

使用包括表面活性剂的溶液来洗涤所述固相载体，从而提供洗脱液；

使所述洗脱液经受酶消化条件，以产生所分离HCP杂质的组分；以及

使用质谱仪鉴定所述所分离HCP杂质的组分。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述表面活性剂是相转移表面活性剂、离子型表面活性剂、阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂或其组合。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述表面活性剂是脱氧胆酸钠、月桂基硫酸钠或十二烷基苯磺酸钠。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种高丰度肽或蛋白的浓度为每种HCP杂质的浓度的约至少1000倍、10,000倍、100,000倍或1,000,000倍。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述相互作用肽配体是组合六肽配体的文库。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述HCP杂质是使用所述质谱仪来定量的，其中每种HCP杂质的检测限为约0.05ppm到0.1ppm。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种高丰度肽或蛋白是抗体、双特异性抗体、抗体片段、抗体的Fab区、抗体-药物缀合物、融合蛋白、蛋白质药物产品或药物。

8.根据权利要求1所述的方法，其中酶消化反应的酶是胰蛋白酶。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述质谱仪是电喷雾电离质谱仪、纳米电喷雾电离质谱仪或三重四极杆质谱仪，其中所述质谱仪耦接到液相色谱法系统。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述质谱仪能够执行LC-MS(液相色谱法-质谱法)或LC-MRM-MS(液相色谱法-多反应监测-质谱法)分析。

11.一种用于鉴定样品中的宿主细胞蛋白(HCP)杂质的系统，所述系统包括：

固相载体；

相互作用肽配体，

其中所述相互作用肽配体与所述固相载体连接，并且

其中所述HCP杂质能够与所述相互作用肽配体结合；

溶液，所述溶液包括表面活性剂；

酶消化溶液，所述酶消化溶液能够由所述HCP杂质产生组分；以及

质谱仪，所述质谱仪能够鉴定所述组分或对所述组分进行定量。

12.根据权利要求11所述的系统，其中所述表面活性剂是相转移表面活性剂、离子型表面活性剂、阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂或其组合。

13.根据权利要求11所述的系统，其中所述表面活性剂是脱氧胆酸钠、月桂基硫酸钠或十二烷基苯磺酸钠。

14.根据权利要求11所述的系统，其中所述至少一种高丰度肽或蛋白的浓度为每种HCP杂质的浓度的约至少1000倍、10,000倍、100,000倍或1,000,000倍。

15.根据权利要求11所述的系统，其中所述相互作用肽配体是组合六肽配体的文库。

16.根据权利要求11所述的系统，其中每种HCP杂质的检测限为约0.05ppm到0.1ppm。