[发明专利]一种阿托西班的合成方法

说明书

本发明属于多肽合成领域，公开了一种阿托西班的合成方法，该方法包括以下步骤：合成Fmoc‑Pro‑Orn‑Gly‑NH₂三肽，以三苯甲基型树脂为起始树脂，制得Fmoc‑Pro‑Orn(三苯甲基型树脂)‑Gly‑NH₂；采用缩合剂依次接入阿托西班序列中相应的保护氨基酸或片段，制得阿托西班线性肽树脂；经裂解、氧化得到阿托西班。本发明有效减少了tBu类杂质的生成，可以减少Pro缺失肽杂质的问题，是一种操作简便，质量易于控制，利于纯化和提升产品质量的阿托西班合成方法。

技术领域

本发明涉及多肽合成领域，尤其涉及一种阿托西班的合成方法。

背景技术

阿托西班注射液(AtosibanAcetate Injection)2000年3月23日首次在奥地利上市，商品名为：阿托西班(Atosiban)，一种由Ferring Gmbh研制的新型抗早产药，是一种催产素类似物，是子宫内及蜕膜、胎膜上催产素受体的竞争性拮抗剂，是欧洲医学会推荐的一线用药；它可以抑制催产素和催产素受体结合，从而直接抑制催产素作用于子宫，抑制子宫收缩；也可以抑制磷脂酰肌醇的水解作用。

阿托西班是一个环九肽，其分子式为C₄₃H₆₇N₁₁O₁₂S₂；分子量为994.19；CAS登记号为90779-69-4；其肽序如下式所示：

Cyclo[Mpa-D-Tyr(Et)-Ile-Thr-Asn-Cys]-Pro-Orn-Gly-NH₂

公告号为CN101314613B和CN101696236B的中国专利中，阿托西班的固相合成使用Rink Amide AM Resin树脂固相逐步偶联得到Mpa(Trt)-D-Tyr(Et)-Ile-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-Gly-Resin，直接固相氧化生成二硫键，再裂解得到阿托西班。现有技术中采用的Rink Amide AM Resin树脂需要在强酸性环境下才能裂解下来，不利于产品稳定且操作危险性较大；Mpr和Cys都有巯基，巯基有捕获tBu的能力生成双tBu杂质，固相氧化后的肽树脂在裂解脱除保护基和树脂时，由于有tBu或tBu源的Boc保护基，对捕获剂要求高，不利于产品质量控制，降低产品收率。

公告号为CN105408344B的中国专利，公开了一种由Fmoc-Orn-Gly-NH₂起始合成阿托西班的方法，其中Fmoc-Orn-Gly-NH₂通过鸟氨酸的侧链连接于三苯甲基树脂上，可以有效控制杂质。然而使用二肽与三苯甲基型树脂偶联，二肽Orn侧链上接入的树脂导致后续Pro偶联的空间位阻增大，偶联时间延长，易造成缺失肽杂质。

因此，需要寻找一种便于偶联和裂解，有利于产品质量稳定，方便安全操作，产品质量可控，提升产品收率的阿托西班合成方法。

发明内容

针对现有技术中存在异构体、插入肽、tBu阳离子捕获杂质以及位阻和反应时间过长导致Pro缺失肽杂质的问题，本发明提供了一种阿托西班的合成方法，所述方法包括如下步骤：

1)合成得到Fmoc-Pro-Orn-Gly-NH₂三肽，之后用树脂与之反应得到Fmoc-Pro-Orn(树脂)-Gly-NH₂肽树脂；

2)脱除Fmoc-Pro-Orn(树脂)-Gly-NH₂的Fmoc保护，之后采用缩合剂依次接入阿托西班序列中相应的保护氨基酸或片段，制得阿托西班线性肽树脂；

3)裂解、氧化，得到阿托西班。