[发明专利]改进的心肌细胞重编程方法

权利要求书

1.一种将起始细胞重编程为心肌细胞的方法，所述方法包括向起始细胞提供以下的转录因子：

i)GATA4、MEF2C和TBX5；和

ii)Myocd和/或Sall4。

2.权利要求1的方法，其中所述方法包括向所述起始细胞提供以下转录因子：GATA4、MEF2C、TBX5、Myocd和Sall4。

3.权利要求1或2的方法，其中所述方法包括将包含编码所述转录因子的核苷酸序列的表达载体导入所述起始细胞。

4.权利要求3的方法，其中所述表达载体是病毒表达载体，优选为慢病毒载体、逆转录病毒载体、腺病毒载体。

5.权利要求1或2的方法，其中所述提供转录因子包括增加起始细胞中内源的所述转录因子的表达和/或活性。

6.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述起始细胞是成纤维细胞，例如所述成纤维细胞选自胚胎成纤维细胞、新生儿心脏成纤维细胞、尾尖成纤维细胞、成年心脏成纤维细胞和来自心脏心梗区的成纤维细胞。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述起始细胞是分离的细胞。

8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述起始细胞来源于哺乳动物或非哺乳动物，例如来源于人、鼠或非人灵长类动物。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述方法还包括在心肌细胞诱导培养基中培养所述起始细胞。

10.权利要求9的方法，其中所述心肌细胞诱导培养基包含TGFβ抑制剂，例如SB43152。

11.权利要求9或10的方法，其中所述心肌细胞诱导培养基含有DMEM/M199(4:1)，补充有10％FBS、10％KSR、1％NEAA、1％Glutamax、1％PS和2μM SB431542。

12.一种通过权利要求1-11中任一项的方法制备的心肌细胞。

13.一种药物组合物，其包含权利要求12的心肌细胞和药学上可接受的载体。

14.权利要求12的心肌细胞或权利要求13的药物组合物在制备用于治疗心脏疾病的药物中的用途。

15.权利要求14的用途，其中所述心脏疾病是心肌疾病，例如心力衰竭、心肌梗死。

16.一种在对象中治疗心脏疾病的方法，所述方法包括给所述对象施用权利要求12的心肌细胞或权利要求13的药物组合物。