[发明专利]固体培养基、液体培养基以及长双歧杆菌高密度培养方法在审
申请号: | 202111668716.5 | 申请日: | 2021-12-31 |
公开(公告)号: | CN114317360A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 李珍益;张晓东;周国华;金志鹏;颜利清 | 申请(专利权)人: | 江苏德禧生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/04;C12N1/38;C12R1/01 |
代理公司: | 北京维正专利代理有限公司 11508 | 代理人: | 李鑫伟 |
地址: | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 固体 培养基 液体 以及 长双歧 杆菌 高密度 培养 方法 | ||
1.固体培养基,其特征在于:包括辣木籽提取物4-8质量份、酵母浸粉5-9质量份、葡萄糖8-12质量份、蛋白胨8-13质量份、无水乙酸钠1-5质量份、柠檬酸三铵1-4质量份、碳酸氢二钾1-4质量份、硫酸镁0.1-0.5质量份、碳酸钾3-7质量份、吐温-80 0.8-1.2质量份、琼脂15-20质量份以及水1000质量份。
2.根据权利要求1所述的固体培养基,其特征在于:还包括罗望子提取物2-5质量份。
3. 根据权利要求2所述的固体培养基,其特征在于:包括辣木籽提取物6-8质量份、罗望子提取物3-4质量份、酵母浸粉7-8质量份、葡萄糖9-11质量份、蛋白胨10-11质量份、无水乙酸钠3-4质量份、柠檬酸三铵2-3质量份、碳酸氢二钾2-3质量份、硫酸镁0.2-0.4质量份、碳酸钾4-5质量份、吐温-80 0.9-1.0质量份、琼脂16-18质量份以及水1000质量份。
4. 液体培养基,其特征在于:包括鲜牛奶6-12质量份、牛肉粉3-7质量份、辣木籽提取物2-6质量份、蛋白胨8-13质量份、柠檬酸三铵1-5质量份、碳酸氢二钾1-5质量份、氯化钠0.2-0.8质量份、碳酸钾0.3-1质量份、吐温-80 0.8-1.2质量份、海藻酸钠1-4质量份以及水1000质量份。
5.根据权利要求4所述的液体培养基,其特征在于:还包括香豆提取物3-7质量份。
6. 根据权利要求5所述的液体培养基,其特征在于:包括鲜牛奶8-10质量份、牛肉粉4-6质量份、辣木籽提取物4-6质量份、香豆提取物4-5质量份、蛋白胨9-11质量份、柠檬酸三铵2-4质量份、碳酸氢二钾2-4质量份、氯化钠0.3-0.6质量份、碳酸钾0.5-0.8质量份、吐温-800.9-1.1质量份、海藻酸钠2-3质量份以及水1000质量份。
7.长双歧杆菌高密度培养方法,其特征在于:包括:
将菌种接种到固体培养基上进行活化;所述固体培养基采用权利要求1-3任一所述的固体培养基;
将在固体培养基上活化的所述菌种移种到液体培养基中进一步活化,扩培至少两次;所述液体培养基采用权利要求4-6任一所述的液体培养基。
8.根据权利要求7所述的长双歧杆菌高密度培养方法,其特征在于:所述固体培养基为固体斜面培养基。
9.根据权利要求7所述的长双歧杆菌高密度培养方法,其特征在于:包括:
S1、取保藏的长双歧杆菌菌种按照体积比为1:(8-12)的接种量接种到所述固体培养基上,在36.5-37.5℃无氧的环境下培养30-36h;
S2、将经过S1活化的长双歧杆菌菌种按照体积比为1:(8-12)的接种量移种到所述液体培养基中,在36.5-37.5℃无氧的环境下培养10-15h;
S3、将经过S2培养的长双歧杆菌菌种按照体积比为1:(8-12)的接种量移种到所述液体培养基中,在36.5-37.5℃无氧的环境下培养10-15h;
S4、重复S3过程若干次,并保持或调整培养时间,实现长双歧杆菌高密度生长。
10.根据权利要求9所述的长双歧杆菌高密度培养方法,其特征在于:所述S1中,接种长双歧杆菌菌种后,在所述固体培养基上平铺融化的PTYG固体培养基;
所述S2-4中,接种长双歧杆菌菌种后,在所述液体培养基上平铺液体石蜡。
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