[发明专利]一种新利司他半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明属于食品检测技术领域，具体提供了一种新利司他半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用，本发明制备得到了两种新利司他半抗原，半抗原CET1和半抗原CET2，应用半抗原CET1得到人工抗原CET1，并进一步制备得到用于检测新利司他的特异性抗体，应用人工抗原CET2‑OVA作为包被原，该抗体对新利司他最低检测限为0.22ng/mL，半抑制浓度为6.57ng/mL，具有良好的灵敏度和特异性，利用该抗体建立了新利司他的免疫分析方法，实现了新利司他的快速、准确检测。

技术领域

本发明涉及食品检测领域，更具体地，涉及一种新利司他半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

背景技术

新利司他(Cetilistat)，又名西替利斯他、赛利司他、西替利斯塔，是一种人体脂肪酶抑制剂，最初由英国Alizyme公司开发，用于治疗肥胖以及由肥胖引起的糖尿病，2003年Alizyme公司将新利司他授权给日本的武田制药公司，并于2013年9月在日本国内上市。该药最大优点是不作用于神经系统，不影响胃肠道的其他酶活性，不被吸收即不进入血液，不抑制食欲，无需限制饮食。用药后24h即可出现排便带油的现象(水面漂浮多量油滴)，即排除未被消化的脂肪。其作用机理是通过与胃和小肠腔内胃脂肪酶和胰脂肪酶的活性丝氨酸部位形成共价键使酶失活而发挥治疗作用，失活的酶不能将食物中的脂肪主要是甘油三酯水解为可吸收的游离脂肪酸和单酰基甘油。未消化的甘油三酯不能被身体吸收，从而减少热量摄入，控制体重。长期服用新利司他会导致肠道作用，脂肪泻、肛门排便增加等不良反应。其他消化道不良反应还包括油性斑点、带便的胃肠排气、脂(油)性便，甚至大便失禁等。

目前新利司他还没有通过国内上市批准，所以国内对新利司他检测方法尚无过多的报道与研究。Yu Zhou用HPLC-PDA的方法检测新利司他(Yu Z,Wan C.A simple andconvenient method for simultaneous determination of four major species ofillegal additives in slimming health food[J].Journal of LiquidChromatographyRelated Technologies,2010,33(4):452-461.)；秦军等对于新利司他的测定也是利用高效液相色谱法HPLC(秦军,王显芹,傅世玲,et al.HPLC determinationmethod for Cetilistat and related impurities:,2015.)。然而，高效液相色谱法虽然具有检测效率高、准确度高、抗干扰能力强等特点；但是，检测所需的仪器设备昂贵、成本高、样品前处理繁杂、需专业人士操作，不符合大批量样品现场检测要求。

与现有的检测方法相比，基于抗原-抗体特异性分子识别的免疫检测方法，在现场检测方面具有更大优势，表现出快速、灵敏、简便等特点，并且成本低廉，对操作人员技能要求较低。然而，免疫分析方法研发的关键在于设计出合适的新利司他半抗原，制备出灵敏度高、特异性强的抗体，但是现有技术中未见有关于新利司他半抗原、人工抗原、抗体的相关报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术中新利司他检测方法的缺陷和不足，提供一种新利司他半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

本发明的目的在于提供新利司他半抗原。

本发明的目的还在于提供新利司他半抗原在制备新利司他人工抗原中的应用。

本发明的目的还在于提供新利司他人工抗原。

本发明的目的还在于提供所述新利司他人工抗原在制备新利司他人工抗体中的应用。

本发明的目的还在于提供一种新利司他抗体。

本发明的目的还在于提供一种检测新利司他的免疫分析方法。

本发明的目的还在于提供一种检测新利司他的试剂盒。