[发明专利]一种动物源活病毒定量检测方法

权利要求书

1.一种动物源活病毒定量检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

a.待测病毒液样品采用叠氮溴化乙锭进行处理；

b.采用等电点沉淀法进一步处理后，取上清液备用；

c.取上清液，提取病毒核酸；

d.采用实时荧光定量PCR进行病毒核酸PCR检测，根据扩增曲线Ct值，计算得到待测病毒液样品中活病毒含量。

2.根据权利要求1所述的动物源活病毒定量检测方法，其特征在于，所述待测病毒液为动物源病毒液。

3.根据权利要求1所述的动物源活病毒定量检测方法，其特征在于，所述待测病毒液样品采用叠氮溴化乙锭进行处理，具体包括：在待测病毒液样品中加入叠氮溴化乙锭溶液，避光混匀，采用强光照射处理。

4.根据权利要求3所述的动物源活病毒定量检测方法，其特征在于，在待测病毒液样品中加入叠氮溴化乙锭溶液，使所述叠氮溴化乙锭在待测病毒液中的终浓度为50～100μmol/mL。

5.根据权利要求3所述的动物源活病毒定量检测方法，其特征在于，所述避光混匀包括，在避光环境下，振荡处理10～20min后；所述强光照射处理包括，采用300～500W LED灯强光照射10～20min。

6.根据权利要求1所述的动物源活病毒定量检测方法，其特征在于，所述等电点沉淀法具体包括：在经过叠氮溴化乙锭处理的待测病毒液样品中，缓慢加入盐酸溶液，调整溶液pH至4.0～5.0，静置1～2h。

7.根据权利要求6所述的动物源活病毒定量检测方法，其特征在于，所述盐酸溶液的浓度为1～2mol/L。

8.根据权利要求1所述的动物源活病毒定量检测方法，其特征在于，所述待测病毒液样品中的病毒包括但不限于：鸡痘病毒、鸡传染性喉气管炎病毒重组鸡痘病毒、鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性法氏囊病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡马立克氏病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒和猪病毒性腹泻病毒。