[发明专利]一种母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测组合物及其应用在审
| 申请号: | 202111658972.6 | 申请日: | 2021-12-30 |
| 公开(公告)号: | CN114354934A | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
| 发明(设计)人: | 马耀坤;杜雯;郑金娥;刘钰;覃磊;商芳影;岳佩琼;宋亮亮;黄士昂 | 申请(专利权)人: | 武汉康圣达医学检验所有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574;G01N33/68;G01N33/58;G01N15/14 |
| 代理公司: | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人: | 万畅 |
| 地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 细胞 浆细胞 树突 肿瘤 残留 检测 组合 及其 应用 | ||
1.一种母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测组合物,其特征在于,包括组合物一和组合物二,其中,所述组合物一至少包括CD56、CD123抗体、CD34抗体、CD4抗体、CD304抗体、HLA-DR抗体、CD303抗体和CD45抗体,所述组合物二至少包括CD64抗体、CD123抗体、CD33抗体、CD11b抗体、HLA-DR抗体、CD15抗体和CD45抗体。
2.根据权利要求1所述的母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测组合物,其特征在于,所述组合物一中,HLA-DR抗体和CD123抗体的质量比为2:1~1:1,CD303抗体和CD304抗体的质量比为1:1~1:3,CD56抗体和CD4抗体的质量比为2:1~4:1。
3.根据权利要求1所述的母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测组合物,其特征在于,所述组合物二中,HLA-DR抗体和CD123抗体的质量比为2:1~1:1,CD15抗体和CD11b抗体的质量比为3:1~5:1,CD64抗体和CD33抗体的质量比为2:1~1:1。
4.根据权利要求2所述的母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测组合物,其特征在于,所述组合物一中CD56抗体、CD123抗体、CD34抗体、CD4抗体、CD304抗体、HLA-DR抗体、CD303抗体和CD45抗体的质量比为(6-12):25:100:(3-4):(30-60):(25-50):(30-90):80。
5.根据权利要求3所述的母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测组合物,其特征在于,所述组合物二中CD64抗体、CD123抗体、CD33抗体、CD11b抗体、HLA-DR抗体、CD15抗体和CD45抗体的质量比为20:5:(10-20):3:(5-10):(9-15):16。
6.根据权利要求2所述的母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测组合物,其特征在于,所述抗体为荧光标记抗体。
7.一种母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1-6任一项所述的组合物、红细胞裂解液和PBS缓冲液。
8.一种母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测方法,其特征在于,采用如权利要求7所述的试剂盒进行检测,包括以下步骤:
步骤S1、分别将CD56抗体、CD123抗体、CD34抗体、CD4抗体、CD304抗体、HLA-DR抗体、CD303抗体和CD45抗体组合物与CD64抗体、CD123抗体、CD33抗体、CD11b抗体、HLA-DR抗体、CD15抗体和CD45抗体组合物加入两个不同的测试管中,然后在两个测试管中均加入待测样品,避光孵育;
步骤S2、在两个测试管中各加入红细胞裂解液,混合均匀,然后室温条件下避光静置,得到裂解混合液;
步骤S3、将所述裂解混合液离心,去除上清液,得到裂解沉淀物;
步骤S4、将所述裂解沉淀物中加入PBS混合均匀,然后离心,再重新加入PBS重悬,得到重悬溶液;
步骤S5、将所述重悬溶液在流式细胞仪上进行检测,并使用BDDivaSoftware对结果进行分析。
9.根据权利要求8所述的母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测方法,其特征在于,通过以下方式对异常树突状细胞进行鉴别:
首先,将HLA-DR和CD123共阳性的细胞圈出;
其次,对该群细胞进一步分析,若CD56阳性和/或CD4阳性,且CD303或CD304阳性则为异常的树突状细胞;
若CD56阴性,且CD304和CD304共阳性则为正常的树突状细胞;
若CD64阳性、CD33阳性、CD15阳性和CD123阳性,则为髓系细胞。
10.权利要求1~6任一项所述的组合物在制备母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤残留检测试剂中的应用。
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