[发明专利]一种脂联素检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种脂联素检测试剂盒及其制备方法，该脂联素检测试剂盒包括R1试剂和R2试剂；R1试剂包括以下成分：缓冲液、电解质、促融剂、表面活性剂和防腐剂；R2试剂包括以下成分：抗脂联素单抗包被胶乳颗粒、缓冲液、保护剂、稳定剂、防腐剂和表面活性剂；其中，表面活性剂选自Tetronic 1307、蓖麻油聚氧乙烯醚中的一种或两种。本发明的试剂盒通过采用新的表面活性剂组合与试剂盒中的其他成分配合，不仅增强了试剂对特殊样本如乳糜类和脂浊类样本的抗干扰能力，减小非特异性吸附的干扰，提升样本测试的准确性，还增强了胶乳试剂的重复性和稳定性。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂领域，尤其涉及一种脂联素检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

脂联素(ADPN)，是脂肪细胞分泌的一种内源性生物活性多肽和蛋白，能在血浆中稳定存在，约占血浆蛋白的0.01％。最早脂联素是在人体皮下脂肪组织、血浆和鼠科动物的脂肪细胞中被发现。

随着对脂联素的研究发现，脂联素是一种胰岛素增敏激素(An Insulin-sensitizing Hormone)，能改善胰岛素抗性(Insulin resistance)和动脉硬化；脂联素水平能预示II型糖尿病和冠心病的发展，并在临床试验表现出与肥胖、糖尿病、胰岛素抵抗、动脉粥样和炎症都有一定相关性。因此，检测血中脂联素水平对这些疾病的诊断和预后均有重要意义。

目前，测定脂联素的方法主要使用化学发光免疫分析法(CLIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)和胶乳增强免疫比浊法。其中，化学发光法灵敏度较高，但需要专门的仪器，价格昂贵；酶联免疫法操作过程极为繁琐和复杂，检测时间长，重复性较差。胶乳增强免疫比浊法是利用一定粒径胶乳颗粒的表面交联单克隆或多克隆抗与抗原结合后，来检测抗原的浓度；现有的胶乳增强免疫比浊法的灵敏度高，但抗干扰性差，低值区重复性差，且制备工艺复杂，耗费人力物力。

因此，现有技术有待进一步改进。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种新的抗干扰能力强、重复性好的脂联素检测试剂盒，并提供了该试剂盒的制备方法。

为解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种脂联素检测试剂盒，其包括R1试剂和R2试剂；其中：

R1试剂包括以下成分：缓冲液、电解质、促融剂、表面活性剂和防腐剂；

R2试剂包括以下成分：抗脂联素单抗包被胶乳颗粒、缓冲液、保护剂、稳定剂、防腐剂和表面活性剂；

其中，表面活性剂选自Tetronic 1307、蓖麻油聚氧乙烯醚、Tween-20、曲拉通-100和Brij-35中的一种或几种。

优选地，R1试剂包括以下浓度的各成分：

缓冲液0.02-0.1M/L；

电解质20-40g/L；

促融剂30-80g/L；

表面活性剂0.2-10g/L；

防腐剂0.8-1.2g/L。

R2试剂包括以下浓度的各成分：

抗脂联素单抗包被胶乳颗粒60-100mg/L；

缓冲液0.01-0.05M/L；

保护剂5-30g/L；

稳定剂5-20g/L；

防腐剂0.8-1.2g/L；

表面活性剂0.2-10g/L。