[发明专利]一种脂联素检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种脂联素检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂和R2试剂；其中：

R1试剂包括以下成分：缓冲液、电解质、促融剂、表面活性剂和防腐剂；

R2试剂包括以下成分：抗脂联素单抗包被胶乳颗粒、缓冲液、保护剂、稳定剂、防腐剂和表面活性剂；

其中，表面活性剂选自Tetronic 1307和蓖麻油聚氧乙烯醚的一种或两种。

2.根据权利要求1所述的脂联素检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂包括Tetronic 1307和蓖麻油聚氧乙烯醚。

3.根据权利要求1所述的脂联素检测试剂盒，其特征在于，所述保护剂选自海藻糖、蔗糖中的一种或两种。

4.根据权利要求1所述的脂联素检测试剂盒，其特征在于，稳定剂选自酪蛋白和牛血清蛋白中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的脂联素检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为TRIS缓冲液、磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液、柠檬酸缓冲液中的一种或几种；所述电解质为氯化钠、氯化钾、氯化钙中的一种或几种；所述促融剂为PEG6000、PEG8000、PEG12000中的一种或几种；所述防腐剂为叠氮钠、Proclin300中的一种或几种。

6.根据权利要求1所述的脂联素检测试剂盒，其特征在于，R1试剂包括以下浓度的各组分：柠檬酸缓冲液0.02-0.1M/L；氯化钠20-40g/L；PEG6000 30-80g/L；Tetronic 1307 0.1-5g/L；蓖麻油聚氧乙烯醚0.1-5g/L；防腐剂0.8-1.2g/L；

R2试剂包括以下浓度的各组分：抗脂联素单抗包被胶乳颗粒：60-100mg/L；HEPES缓冲液0.01-0.05M/L；海藻糖5-30g/L；牛血清蛋白5-20g/L；Tetronic 1307 0.1-5g/L；蓖麻油聚氧乙烯醚0.1-5g/L；防腐剂0.8-1.2g/L。

7.根据权利要求6所述的脂联素检测试剂盒，其特征在于，R1试剂的防腐剂采用0.8-1.2g/L的叠氮钠，R2试剂中的防腐剂采用0.8-1.2g/L的Proclin300。

8.如权利要求1所述的脂联素检测试剂盒的制备方法，其特征在在于，包括以下步骤：

R1试剂的配制：按照试剂R1的组分含量，将缓冲液、电解质、促融剂、表面活性剂、防腐剂等依次分别溶于纯水中，搅拌均匀，调pH至6.0-7.4，搅拌均匀后置于35-40℃烘箱孵育一晚即得R1试剂；

试剂R2的配制：向抗脂联素单抗包被胶乳颗粒中边搅拌边分别加入缓冲液、稳定剂和表面活性剂，最后加入防腐剂和保护剂，在35-40℃摇床稳定一夜后即得R2试剂。

9.根据权利要求8所述的脂联素检测试剂盒的制备方法，其特征在在于，所述抗脂联素单抗包被胶乳颗粒的制备方法为：取粒径为100-300nm的胶乳微球于MES缓冲液中，于35-40℃摇床，100-300r/min，摇匀3-10min；之后加入现配的EDC和NHS溶液，置于35-40℃摇床，100-300r/min，活化胶乳10-20min；在搅拌的情况下，加入缓冲液和抗脂联素单抗，置于35-40℃摇床，100-300r/min，偶联1-5h。

10.根据权利要求9所述的脂联素检测试剂盒的制备方法，其特征在在于，在添加缓冲液、稳定剂和表面活性剂时，要在添加完前一种物质并于35-40℃摇床孵育20-40min后再加入后一种物质。