[发明专利]一种用于精确检测病毒的探针载体及其制备方法以及应用

权利要求书

1.一种用于精确检测病毒的探针载体的应用，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将氮化硼纳米管分散在去离子水中，然后加入核酸引物，冰水浴条件下超声处理，制得引物-纳米材料分散液；将核酸探针加入到氧化石墨烯/碳纳米管复合颗粒的分散液中，冰水浴下超声处理，制得探针-纳米复合材料分散液；

(2)将聚乙二醇二丙烯酸酯溶液、聚乙二醇溶液、紫外光引发剂溶液和探针-纳米复合材料分散液以等体积混合均匀制得第一预聚物溶液；将聚乙二醇二丙烯酸酯溶液、聚乙二醇溶液、紫外光引发剂溶液和引物-纳米材料分散液以等体积混合均匀制得混合液，然后加入混合液体积1/9的丙烯酸修饰的核酸引物溶液，制得第二预聚物溶液；将第一预聚物溶液滴加到干净的PDMS基底上，进行光交联，然后在已固化的凝胶上滴加第二预聚物溶液进行光交联反应，制得用于RT-QPCR的双层特异性微粒。

2.根据权利要求1所述的一种用于精确检测病毒的探针载体的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述氮化硼纳米管、核酸引物的用量比为1μg：1pmol，核酸探针、氧化石墨烯/碳纳米管复合颗粒的用量比为1pmol：1μg。

3.根据权利要求1所述的一种用于精确检测病毒的探针载体的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述超声处理的功率为100-200W，时间为30min。

4.根据权利要求1所述的一种用于精确检测病毒的探针载体的应用，其特征在于，步骤(2)中，所述聚乙二醇二丙烯酸酯溶液的质量浓度为20％，聚乙二醇溶液为质量浓度为20％的聚乙二醇700溶液，所述紫外光引发剂溶液为质量浓度为5％的Darocur 1173溶液。

5.根据权利要求1所述的一种用于精确检测病毒的探针载体的应用，其特征在于，步骤(2)中，所述光交联时的紫外线的光强度为0.3mW/cm²，交联时间为30s。

6.根据权利要求1所述的一种用于精确检测病毒的探针载体的应用，其特征在于，步骤(2)中，第一预聚物溶液、第二预聚物溶液的体积比为1：(2.5-3)。

7.根据权利要求1所述的一种用于精确检测病毒的探针载体的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述碳纳米管的直径为5-10nm；所述氧化石墨烯和碳纳米管的质量比为(1-2)：1。

8.根据权利要求1至7任一所述的用于精确检测病毒的探针载体，其特征在于，所述载体为氧化石墨烯与碳纳米管复合形成的纳米颗粒。

9.根据权利要求8所述的用于精确检测病毒的探针载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将氧化石墨烯溶液碳纳米管混合，超声处理，之后过滤，将固体洗涤后干燥即得。

10.根据权利要求9所述的用于精确检测病毒的探针载体的制备方法，其特征在于，所述氧化石墨烯溶液的浓度为3-5mg/ml，所述超声处理的功率为500-600W，时间为30-60min。